[发明专利]甲氧基聚乙二醇修饰的精氨酸脱亚氨酶及其制备与应用

权利要求书

1.一种甲氧基聚乙二醇修饰的精氨酸脱亚氨酶的制备方法，包括下列步骤：

a、将精氨酸脱亚氨酶安慰性底物与精氨酸脱亚氨酶混合反应，使精氨酸脱亚氨酶安慰 性底物与精氨酸脱亚氨酶的活性位点结合，精氨酸脱亚氨酶安慰性底物对精氨酸脱 亚氨酶的摩尔比为1∶1-50∶1；

b、将结合了精氨酸脱亚氨酶安慰性底物的精氨酸脱亚氨酶用甲氧基聚乙二醇修饰，所 述的甲氧基聚乙二醇重均分子量范围在5,000到60,000之间；所述的精氨酸脱亚胺 酶与3个到10个聚乙二醇分子共价连接；

c、分离纯化甲氧基聚乙二醇修饰的精氨酸脱亚氨酶；

所述精氨酸脱亚氨酶安慰性底物选自BOC-精氨酸或FMOC-精氨酸，所述的精氨酸脱亚 氨酶为精氨酸支原体、人型支原体或关节炎型支原体的精氨酸脱亚氨酶。

2.如权利要求1所述甲氧基聚乙二醇修饰的精氨酸脱亚氨酶的制备方法，其特征在于，所 述精氨酸脱亚氨酶安慰性底物对精氨酸脱亚氨酶的摩尔比为3∶1-10∶1。

3.如权利要求1或2所述甲氧基聚乙二醇修饰的精氨酸脱亚氨酶的制备方法，其特征在于， 所述步骤c的分离纯化步骤，包括将步骤b的产物通过抗精氨酸脱亚氨酶抗体亲和层析 柱去除暴露有免疫原性位点的聚乙二醇化精氨酸脱亚氨酶。

4.一种甲氧基聚乙二醇修饰的精氨酸脱亚氨酶，由权利要求1-3中任一权利要求所述甲氧 基聚乙二醇修饰的精氨酸脱亚氨酶的制备方法制得。

5.如权利要求4所述甲氧基聚乙二醇修饰的精氨酸脱亚氨酶，其特征在于，所述的精氨酸 脱亚氨酶为精氨酸支原体、人型支原体或关节炎型支原体的精氨酸脱亚氨酶。

6.如权利要求5所述甲氧基聚乙二醇修饰的精氨酸脱亚氨酶，其特征在于，所述甲氧基聚 乙二醇通过连接基团与所述精氨酸脱亚胺酶的伯胺共价相连。

7.一种药物组合物，它含有安全有效量的权利要求4-6中任一权利要求所述甲氧基聚乙二 醇修饰的精氨酸脱亚氨酶以及药学上可接受的载体或赋形剂。

8.权利要求4-6中任一权利要求所述甲氧基聚乙二醇修饰的精氨酸脱亚氨酶在制备治疗 癌症药物上的应用。