[发明专利]活体穿刺技术检查蟹类卵巢发育的方法

权利要求书

1.一种活体穿刺技术检查蟹类卵巢发育的方法，包括以下步骤：

(1)穿刺部位为蟹头胸甲前缘、靠近眼睛后的区域，所述穿刺部位打磨平整，以便于取样后密封穿刺孔；同时将穿刺部位打磨变薄，以便于采用穿刺针扎入卵巢组织取样；

步骤(1)中用砂纸或者微型抛光机将穿刺部位抛光平整，以便取样后密封穿刺孔，防止海水进入；打磨过程使穿刺部位变薄，便于穿刺针扎入蟹体内进行取样；

(2)穿刺针穿透穿刺部位，迅速取样后密封穿刺孔；

步骤(2)取样完毕后用502胶和塑料片密封，等胶水固化后将蟹放回海水中；

(3)取样的卵巢组织直接用肉眼观察卵巢外观，初步判断其发育情况或用于组织学和分子生物学研究。

2.根据权利要求1所述的一种活体穿刺技术检查蟹类卵巢发育的方法，其特征在于：所述穿刺部位、微型抛光机、穿刺针经过消毒，防止细菌感染造成蟹的死亡。

3.根据权利要求1所述的一种活体穿刺技术检查蟹类卵巢发育的方法，其特征在于：步骤(2)所述穿刺孔的孔径为0.46-1.31mm。

4.根据权利要求1所述的一种活体穿刺技术检查蟹类卵巢发育的方法，其特征在于：所述塑料片柔软、完全贴合蟹甲壳表面，且不透水。

5.根据权利要求1所述的一种活体穿刺技术检查蟹类卵巢发育的方法，其特征在于：所述502胶选用凝固性佳，在5分钟内完全凝固。

6.根据权利要求1所述的一种活体穿刺技术检查蟹类卵巢发育的方法，其特征在于：步骤(3)中利用组织学统计卵母细胞直径，所述卵母细胞的直径是指长径，然后推算卵巢指数，是指利用卵母细胞细胞直径与卵巢指数的回归方程来计算卵巢指数。

7.根据权利要求6所述的一种活体穿刺技术检查蟹类卵巢发育的方法，其特征在于：用于预测雌体卵巢指数的回归方程的回归曲线统计卵巢发育三期的雌体30个以上，统计优势卵母细胞的长径，所述卵巢发育三期主要为外源性卵黄合成期的卵母细胞；所述优势卵母细胞是指同一个体的切片中，该类型的细胞必需占细胞总数的70％以上。