[发明专利]果汁中耐热菌的快速检测方法

权利要求书

1、一种果汁中耐热菌的快速检测方法，其特征在于该方法是在果汁中接种耐热菌(BAM)培养基，使检测样品大量繁殖并迅速产生愈创木酚，利用愈创木酚在含有过氧化物酶的缓冲体系中与过氧化氢的反应，快速检测果汁中的耐热菌，具体检测按下述步骤进行：

a、将检测的果汁加热，加热温度为80℃，时间为10min，然后加入含香草酸浓度为100ppm的耐热菌(BAM)培养基为培养液，培养液在45℃温度下，静止培养24h，加滴的耐热菌(BAM)培养基与果汁的体积比为3∶1；

b、在上述培养液中加入浓度为50ppm的邻苯二甲酸氢钾溶液、3％的过氧化氢溶液和20U/ml的过氧化物酶溶液混匀后，在室温下反应10min，培养液与邻苯二甲酸氢钾溶液、过氧化氢溶液和过氧化物酶溶液的体积比分别为2∶1、20∶1和20∶3；

c、用分光光度计测定或用肉眼观察上述反应的颜色变化，分光光度计测定OD470≥0.5或肉眼观察上述反应出现红褐色，则表示检测的果汁中含有耐热菌；分光光度计测定OD470＜0.5或肉眼观察上述反应未出现红褐色，则表示检测的果汁中不含有耐热菌。

2、根据权利要求1所述果汁中耐热菌的快速检测方法，其特征在于所述耐热菌(BAM)培养基由培养基A液和培养基B液按体积比为1000∶1配制而成，培养基A液和培养基B液为下述组分混合而成，所述物质按重量百分比计：

A液：

CaCl₂.2H2O：  0.20～0.30g    MgSO₄.7H₂O：  0.45～0.55g

(NH₄)₂SO₄：   0.15～0.25g    酵母粉：      1.50～2.50g

葡萄糖：      4.50～5.50g    KH₂PO₄：      2.50～3.50g

蒸馏水：      1000mL

B液：

CaCl.2H₂O：   0.56～0.76mg    MnSO₄.4H₂O：  0.10～0.20mg

NaMoO₄.2H₂O： 0.25～0.35mg    ZnSO₄.7H2O：  0.10～0.30mg

CoCl₂.6H₂O：  0.10～0.30mg    CuSO₄.5H₂O：  0.10～0.30mg

H₃BO₃：       0.05～0.15mg    蒸馏水：      1.00mL

3、根据权利要求2所述果汁中耐热菌的快速检测方法，其特征在于所述培养基A液用硫酸酸化，其pH值为4.0。