[发明专利]一种嗜酸乳杆菌冻干菌粉的制备方法

权利要求书

1.一种嗜酸乳杆菌冻干菌粉的制备方法，其工艺流程包括嗜酸乳杆菌发酵培养、发酵液分离、菌泥乳化和乳化液真空冷冻干燥，其特征在于：所述菌种发酵工艺是将嗜酸乳杆菌菌种接入三角瓶液体培养基中进行培养，30～40℃培养10～30小时，所述三角瓶液体培养基的重量百分比组成为：蛋白胨0.5～1.5％、葡萄糖0.2～0.6％，酵母膏0.5～1.5％，牛肉膏0.4～0.8％，硫酸镁0.02％，硫酸锰0.02％，氯化钠0.003％，硫酸亚铁0.001％，醋酸钠0.4％，柠檬酸二胺0.2％，磷酸二氢钾0.2％，吐温-800.001％，其余为水，121℃灭菌20分钟；再接入大发酵罐进行发酵培养，30～40℃培养10～30小时，所述的大发酵罐发酵培养基的重量百分比组成为：蛋白胨0.5～1.5％，葡萄糖0.2～0.6％，酵母浸提物0.5～1.5％，乙酸钠0.067％，硫酸镁0.001％，硫酸锰0.001％，硫酸亚铁0.001％，氯化钠0.001％，其余为水；115℃灭菌15分钟，并以补加氢氧化钠溶液控制培养酸度为pH4.0～6.5；所述的菌泥乳化工艺，按照活菌菌泥∶菌泥保护剂＝0.1∶1～1∶0.1的比例将菌泥与菌泥保护剂混合乳化，菌泥保护剂配方各组份重量百分比为谷氨酸钠0.1～5.0％、乳糖0.1～8.0％、海藻糖1～15％、抗氧化剂0.1～1％、脱脂奶粉1～20％、甘油或吐温-80 0.1～5.0％，其余为水，菌泥保护剂在105℃～115℃条件下灭菌15分钟后冷却至5～20℃备用；所述的抗氧化剂在异维生素C、谷氨酸和甘氨酸中选择一种。

2.根据权利要求1所述的一种嗜酸乳杆菌冻干菌粉的制备方法，其特征在于：所述大发酵罐发酵培养，发酵液pH值为4.0～5.0，OD600为2.0以上，镜检嗜酸乳杆菌形态正常，无杂菌，终止发酵。

3.根据权利要求1所述的一种嗜酸乳杆菌冻干菌粉的制备方法，其特征在于：所述的发酵液分离方法，以孔径大小在0.01～1μm，0.05MPa～0.5MPa水压条件下通过陶瓷膜过滤分离菌体，或以4000～10000rpm条件下进行以管式或碟片式离心机分离菌体，并以无菌水洗涤1～2次，得到菌泥。

4.根据权利要求1所述的一种嗜酸乳杆菌冻干菌粉的制备方法，其特征在于：所述的乳化液真空冷冻干燥工艺，其特征在于干燥条件为：在-60～-40℃预冻1～5小时后真空冷冻干燥，冷冻干燥温度为-60℃，真空度为1～8pa，真空冷冻干燥10～30小时；干燥后得到活菌数大于1.0×10¹¹cfu/g的嗜酸乳杆菌冻干菌粉。

5.根据权利要求1或3所述的一种嗜酸乳杆菌冻干菌粉的制备方法，其特征在于：所述菌种发酵、发酵液分离和菌泥乳化的操作环境条件要求为在温度低于25度、湿度RH＜35％的洁净环境中进行。