[发明专利]结合结核杆菌噬菌体尾部蛋白的抗体及其制备方法和应用有效
申请号: | 200910057771.3 | 申请日: | 2009-08-20 |
公开(公告)号: | CN101993490A | 公开(公告)日: | 2011-03-30 |
发明(设计)人: | 胡志能;杨挥 | 申请(专利权)人: | 上海英伯肯医学生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K16/08 | 分类号: | C07K16/08;C12N5/20;C12N15/06;C12P21/08;G01N33/569;G01N33/558 |
代理公司: | 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 | 代理人: | 王函 |
地址: | 201203 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 结合 结核杆菌 噬菌体 尾部 蛋白 抗体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种结合结核杆菌噬菌体尾部蛋白的抗体,该抗体能识别结核杆菌噬菌体。
2.如权利要求1所述的抗体,其特征在于,该抗体是单克隆抗体。
3.如权利要求1所述的抗体,其特征在于,该抗体是抗体片段。
4.如权利要求3所述的抗体,其特征在于,该抗体是Fab。
5.如权利要求1至4任一项所述的抗体,其特征在于,该抗体是标记的抗体。
6.如权利要求5所述的抗体,其特征在于,该抗体是胶体金标记的抗体。
7.如权利要求1所述的抗体,其特征在于,该抗体用含结核杆菌噬菌体尾部蛋白第20到80位氨基酸的多肽做抗原免疫小鼠获得;该结核杆菌噬菌体尾部蛋白片段具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
8.一种包含权利要求1-7任一项所述的抗体的溶液和装置。
9.一种产生权利要求1,2,3,4和7中任一项所述的抗体的细胞。
10.一种如权利要求1-7任一项所述的抗体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)合成结核杆菌噬菌体尾部蛋白片段:通过分子克隆的方法将含SEQ ID NO:1序列的核酸插入到pcDNA3载体,测序鉴定后选正确克隆扩增,提取DNA后转化大肠杆菌,表达并纯化结核杆菌噬菌体尾部蛋白的片段;
(2)将步骤(1)纯化的结核杆菌噬菌体尾部蛋白片段免疫小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞融合,挑选产生抗体好的细胞株,注射小鼠腹腔;注射后10天左右抽取腹水并纯化抗体。
11.一种结合结核杆菌噬菌体尾部蛋白的抗体在检测结核杆菌中的应用,其特征在于,采用胶体金法免疫层析测试笔检测结核杆菌噬菌体的方法,测试笔中胶体金标记的抗体为权利要求6所述的抗体,测试线上固定的抗体为权利要求1-4任一项所述的抗体。
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