[发明专利]结合结核杆菌噬菌体尾部蛋白的抗体及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 200910057771.3 申请日: 2009-08-20
公开(公告)号: CN101993490A 公开(公告)日: 2011-03-30
发明(设计)人: 胡志能;杨挥 申请(专利权)人: 上海英伯肯医学生物技术有限公司
主分类号: C07K16/08 分类号: C07K16/08;C12N5/20;C12N15/06;C12P21/08;G01N33/569;G01N33/558
代理公司: 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 代理人: 王函
地址: 201203 上海市浦*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 结合 结核杆菌 噬菌体 尾部 蛋白 抗体 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种结合结核杆菌噬菌体尾部蛋白的抗体,该抗体能识别结核杆菌噬菌体。

2.如权利要求1所述的抗体,其特征在于,该抗体是单克隆抗体。

3.如权利要求1所述的抗体,其特征在于,该抗体是抗体片段。

4.如权利要求3所述的抗体,其特征在于,该抗体是Fab。

5.如权利要求1至4任一项所述的抗体,其特征在于,该抗体是标记的抗体。

6.如权利要求5所述的抗体,其特征在于,该抗体是胶体金标记的抗体。

7.如权利要求1所述的抗体,其特征在于,该抗体用含结核杆菌噬菌体尾部蛋白第20到80位氨基酸的多肽做抗原免疫小鼠获得;该结核杆菌噬菌体尾部蛋白片段具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。

8.一种包含权利要求1-7任一项所述的抗体的溶液和装置。

9.一种产生权利要求1,2,3,4和7中任一项所述的抗体的细胞。

10.一种如权利要求1-7任一项所述的抗体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)合成结核杆菌噬菌体尾部蛋白片段:通过分子克隆的方法将含SEQ ID NO:1序列的核酸插入到pcDNA3载体,测序鉴定后选正确克隆扩增,提取DNA后转化大肠杆菌,表达并纯化结核杆菌噬菌体尾部蛋白的片段;

(2)将步骤(1)纯化的结核杆菌噬菌体尾部蛋白片段免疫小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞融合,挑选产生抗体好的细胞株,注射小鼠腹腔;注射后10天左右抽取腹水并纯化抗体。

11.一种结合结核杆菌噬菌体尾部蛋白的抗体在检测结核杆菌中的应用,其特征在于,采用胶体金法免疫层析测试笔检测结核杆菌噬菌体的方法,测试笔中胶体金标记的抗体为权利要求6所述的抗体,测试线上固定的抗体为权利要求1-4任一项所述的抗体。

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