[发明专利]用寇氏隐甲藻工业化发酵生产二十二碳六烯酸的方法

权利要求书

1.用寇氏隐甲藻(Crypthecodinium cohnii)工业化发酵生产二十二碳六烯酸油脂的方 法，包括以寇氏隐甲藻为菌种，采用包含碳源、氮源和无机盐的培养基，经发酵制 得二十二碳六烯酸油脂；其特征在于：所述每100ml培养基含有：4.0g豆粕粉水解 汁、0.6g酵母膏、5.0g葡萄糖、0.6g磷酸二氢钾、1.0g海盐、0.1g苏木糖醇、3.0g 豆芽汁、0.8g谷氨酸钠、1.0g糖蜜、0.3g七水硫酸镁、0.1g精氨酸；或者所述每 100ml培养基含有：6.0g豆粕粉水解汁、0.5g酵母膏、6.0g葡萄糖、0.4g磷酸二 氢钾、1.0g谷氨酸钠、0.5g玉米浆、0.3g七水硫酸镁、1.0g海盐；或者所述每100ml 培养基含有：8.0g豆粕粉水解汁、0.5g酵母膏、6.0g葡萄糖、0.4g磷酸二氢钾、 1.0g海盐、3.0g豆芽汁、1.0g谷氨酸钠、0.5g玉米浆、0.3g七水硫酸镁；或者所 述每100ml培养基含有：8.0g豆粕粉水解汁、0.7g酵母膏、8.0g葡萄糖、0.4g磷 酸二氢钾、1.0g海盐、0.005g维生素B₁₂、4.0g豆芽汁、1.0g谷氨酸钠、0.7g玉 米浆、0.3g七水硫酸镁、0.005g维生素B₁；上述培养基中的豆粕粉水解汁由下法 得到：将豆粕粉溶解在水中，豆粕粉和水的用量重量比为1∶3-1∶10，调节pH至 9.0-10.0，并升温至70-80℃，保温8-10h，过滤取清液得到豆粕粉水解汁；上 述培养基中的豆芽汁由下法得到：将黄豆芽洗净，沥干，用压榨机压榨取黄豆芽汁 液得到豆芽汁。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述发酵用菌种为经斜面活化培养、然 后转接入摇瓶扩大培养、再经一级扩大培养得到的寇氏隐甲藻；或为经斜面活化培 养、然后转接入摇瓶扩大培养、再经一级扩大培养和二级扩大培养后得到的寇氏隐 甲藻。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：在发酵培养48-60h时补充菌种， 菌种的补入量为发酵液体积的8-10％。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：在发酵过程中，当发酵液的还原糖 含量在2-3wt％时补充碳源。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于在发酵培养过程中逐渐增加溶氧：初始通 气量为0.5VVM，以后每次补充碳源后提高通气量0.02VVM。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：在发酵进入稳定期前期，控制温度 为29-31℃，在进入稳定期后控制温度为22-24℃。