[发明专利]一种小麦酒精废糟液生产真菌菌粉及真菌多糖的方法无效
申请号: | 200910066217.1 | 申请日: | 2009-10-22 |
公开(公告)号: | CN101709308A | 公开(公告)日: | 2010-05-19 |
发明(设计)人: | 曹文伟;杨建武;左丽萍 | 申请(专利权)人: | 河南健古生物工程有限公司 |
主分类号: | C12P1/02 | 分类号: | C12P1/02;C12P19/04;C12R1/79;C12R1/645 |
代理公司: | 洛阳市凯旋专利事务所 41112 | 代理人: | 林志坚 |
地址: | 471003 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 小麦 酒精 废糟液 生产 真菌 多糖 方法 | ||
1.一种小麦酒精废糟液生产真菌菌粉及真菌多糖的方法,其特征是:所述小麦酒精废糟液以小麦为原料,经过液体深层发酵,酿造酒精,获得酒精废糟液,包括如下步骤:
a、获得清液:
将所述小麦酒精废糟液中的固体由液体分离分离出来,获得清液;
b、获得菌种扩培培养基,进行菌种扩培;
1)、斜面菌种培养基制备和斜面菌种扩培;斜面菌种培养基采用PDA综合培养基接种于24-27℃下培养10-15天;
2)、摇瓶培养基,种子发酵罐的培养基制备及种子扩培:
摇瓶培养基和种子发酵罐培养基相同,即步骤a所获得清液加入0-0.5%酵母膏;0-4%蔗糖,用NaOH和HCl调PH值至5.5-6.5;
摇瓶培养:取前述获取物250毫升的三角瓶内,装入70-90毫升的培养基,750毫升三角瓶,装量为100-120毫升/瓶;灭菌后,冷却至30℃时接入斜面菌种“PDA培养基上生长的,不超过10天的食用、药用真菌的菌种”用接种下一小块,大约1cm2左右纯培养物,于24-27℃条件下,静置24小时后置于摇床上160-180rpm于24-27℃左右,振荡培养48-72小时;
c、种子发酵罐培养:
在通用式机械搅拌发酵罐或者气升式气体搅拌式发酵罐中进行;常规灭菌后按5-10%接种量,接入摇瓶种子,其发酵条件为:采用机械搅拌式发酵罐;0-12小时:搅拌速度为80-100rpm,通气量为0.5∶1vvm;或12-72小时搅拌速度120rpm-140rpm通气量为0.5∶1vvm,采用气升式空气搅拌式发酵罐;或0-12小时时0.25∶1vvm,12-72小时为0.5∶1vvm;其中种子发酵罐培养温度为24-27℃;发酵周期为48-72小时;
获得发酵培养基后,进行食用、药用真菌液体深层发酵:发酵培养基的成份与摇瓶、种子发酵罐的扩培培养基相同;即步骤a所获得清液加入0-0.15%酵母膏,0-4%蔗糖,用NaOH和HCl调PH值至5.5-6.5;然后常规灭菌,灭菌后按5-10%的接种量,接入种子;
其中发酵控制:前72小时与种子发酵罐条件相同,用机械搅拌发酵罐;72-144小时,搅拌速度为160-200rpm,通气为0.5∶1vvm,气升式生物反应器空气搅拌的条件;72-144小时为0.75∶1vvm;发酵温度为24-27℃,然后进入食用、药用真菌菌粉的生产,其中按本步骤发酵至144小时左右,还原糖下降变缓,即可终止发酵;
d、将发酵液“内含菌丝体”加入提取多糖时获得的泸饼,以调解含水量;通过胶体磨、研磨、均质,使其基质颗粒小于5微米,通过离心式喷雾干燥机,喷雾干燥成食用、药用真菌菌粉,其中水份为≤10%;
e、食用、药用真菌多糖的生产:按步骤c,发酵终止时将发酵罐内温度控制到90℃,维持5小时,待冷却在35℃左右进行板框过滤;然后收集滤液,真空浓缩至原体积的1/5左右;通过离心式喷雾干燥机,喷雾干燥,成为食用、药用真菌多糖产品;所述滤饼,在生产菌粉时待用。
2.根据权利要求1所述的小麦酒精废糟液生产真菌菌粉及真菌多糖的方法,其特征是:所述PDA综合培养基为马铃薯200克,蔗糖20克,磷酸二氢钾3克,硫酸镁1.5克,水1000毫升,琼脂20克。
3.根据权利要求1或2所述的小麦酒精废糟液生产真菌菌粉及真菌多糖的方法,其特征是:所述PDA综合培养基的加工为:200克马铃薯,洗净去皮切成小块,加水1000ml煮沸半个小时或高压蒸煮20分钟,纱布过滤,再依次添加蔗糖20克,磷酸二氢钾3克,硫酸镁1.5克,水1000毫升和琼脂20克,充分溶解后趁热纱布过滤,分装试管,每试管约5-10ml“视试管大小而定”,15磅蒸气“121℃”灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面,冷却后贮存待用。
4.根据权利要求1所述的小麦酒精废糟液生产真菌菌粉及真菌多糖的方法,其特征是:所述步骤a的获得清液过程为:利用离心机对所述小麦酒精废糟液离心方式获得所述清液,或利用过滤方式获得所述清液,或将所述离心或过滤方式获得的清液浓缩后再次加水稀释获得所述清液。
5.根据权利要求1或4所述的小麦酒精废糟液生产真菌菌粉及真菌多糖的方法,其特征是:将步骤b或c获得摇瓶培养基种子发酵罐的培养基和发酵培养基;摇瓶、种子罐、发酵罐的培养基均用小麦酒精废糟液由步骤a所获得的清液为母体加入酵母膏0-0.5%,蔗糖0-4%,调PH值5.5-6.5而制成。
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