[发明专利]一种具靶向作用的阿霉素-白蛋白微球制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及以超声雾化法制备阿霉素-白蛋白微球和其作为靶向性抗肿瘤药方面的应用，属于医药技术领域。

背景技术：

阿霉素(Adriamycin，ADR)是一种抑制癌细胞DNA合成的抗肿瘤药物，广泛应用于实体瘤的治疗，但因其对消化道、心脏及骨髓抑制等毒性，限制其临床应用。目前减少阿霉素毒性的主要方法是应用药物载体改变阿霉素在组织和器官中的分布，减少阿霉素在全身特别是心脏中的分布，提高其在靶组织的含量。

微球作为一种药物载体具有靶向性，已有多种制备方法。本发明采用“超声雾化法”新方法制备阿霉素白蛋白微球。通过超声波产生含药白蛋白雾滴，通过丙酮等有机溶媒蒸汽对形成的雾滴进行分散、初步固化，通过加热、加入交联剂等方法使其彻底变性、固化，形成微球。该方法可大规模连续生产载药白蛋白微球。制备的微球具有良好的肝、脾靶向性，并可明显降低所载药物在心脏、脑、肠等中的分布。

本发明以阿霉素-白蛋白微球为例，阐明应用超声雾化法制备载药白蛋白微球的方法；制备的微球生物学性质、在不同组织和器官中的分布特征。

发明内容

本发明首次提供了超声雾化法制备阿霉素-白蛋白微球的方法。所制备的阿毒素-白蛋白微球可作为新型靶向性抗肿瘤药物开发和应用。

通过超声波产生含药白蛋白雾滴，通过丙酮等有机溶媒蒸汽对形成的雾滴进行分散、初步固化，使其不能相互碰撞形成大的液滴，随即通过加热、加入交联剂等方法使其彻底变性、固化，形成微球。该方法可大规模、连续制备微球，适合工业化生产。

本发明制备的阿霉素-白蛋白微球经激光微粒测定仪检测，其粒径分布在0.1～5.0μm之间，平均值为2.16μm，其中93％＜5μm；平均载药量在1-5％之间；静脉给药五分钟后既有三分之二由血液中清除进入组织和器官，由血中清除的速率高；采用动态透析法考察阿霉素-白蛋白微球的体外释药规律，阿霉素-白蛋白微球溶液释药呈持续缓慢状态，在168小时释放度仅达80％，具有缓释作用；阿霉素-白蛋白微球组给药后的60min在肝和脾的阿霉素平均浓度分别为游离阿霉素组的四倍以上，对肝和脾表现出明显的靶向性；而在心脏中，游离阿霉素组的阿霉素含量高于阿霉素-白蛋白微球组5倍以上，心脏中的分布明显降低；阿霉素-白蛋白微球组各时间点在脑、小肠、胃均未检测到，表明脑、小肠、胃中几乎没有分布。

该方法制备的微球可根据要求，通过改变固化时间、加入固化剂的量制备不同降解时间的微球；通过改变加入白蛋白溶液不同的药物，制备含不同药物的白蛋白微球；通过改变加入药物的量，制备含药量不同的白蛋白微球。

附图说明

下面结合附图和实施方案对本发明进一步说明。

图1是交联剂浓度与降解时间关系图；

图2是固化时间与降解时间关系图；

图3是阿霉素和阿霉素-白蛋白微球的体外释药曲线图；

实施方案

阿霉素-白蛋白微球通常是通过以下两种方法制得的。

方法1：在超声雾化器中加入阿霉素与人血白蛋白混合水溶液，其中人血白蛋白水溶液的浓度可在2％-6％之间，阿霉素的浓度可在1％-5％之间。将加热产生的丙酮蒸汽导入到一密闭管道中，管道的末端连接一冷凝器和接收器，当丙酮蒸汽充满管道后，开动超声雾化器并将产生的雾滴导入到丙酮蒸汽的管道中，与丙酮蒸汽充分混合，使其中的白蛋白溶液变性、固化，由雾滴转变为微球；混合后的气体通过冷凝器冷却、收集，得到含初步固化微球的丙酮溶液。收集完毕后，取下接收瓶，在1500r.min^-1磁力搅拌下，根据降解时间的需要，缓慢加入戊二醛交联剂，搅拌一定时间，离心，收集制备的微球，用蒸馏水反复离心洗涤，即得红色阿霉素-白蛋白微球。

方法2：按照方法一，制得含初步固化微球的丙酮溶液，收集完毕后，取下接收瓶，放到水浴中，在1500r.min^-1磁力搅拌下加热回流，使其彻底变性、固化，用蒸馏水反复离心洗涤，制得含阿霉素的白蛋白微球。

交联剂的浓度、固化时间的选择：交联剂的浓度、固化时间对微球的生物降解(胰蛋白酶法)影响显著(见图1和图2)。戊二醛浓度＞0.20％后，每增大0.05％，体外降解时间相应增长约20min。图2表明固化时间超过90min后降解时间无明显变化，固化时间90min为宜。