[发明专利]一种新的载脂蛋白A-Ⅱ的制备有效
申请号: | 200910067153.7 | 申请日: | 2009-06-22 |
公开(公告)号: | CN101928723A | 公开(公告)日: | 2010-12-29 |
发明(设计)人: | 颜炜群;苏曼曼 | 申请(专利权)人: | 吉林圣元科技有限责任公司 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12P21/02;C07K14/775;C07K1/18;C07K1/20;C12R1/84 |
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地址: | 130021 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脂蛋白 制备 | ||
1.一种使用甲基营养酵母生产重组人载脂蛋白A-II多肽的方法,该方法包括:在以甲醇为碳源和能源的培养基中培养甲基营养酵母,其中所说的甲基营养酵母是用包括下列可操作连接的元件的DNA构建体转化的:(1)甲基可诱导的转录启动子;(2)编码人载脂蛋白A-II的DNA片段;(3)转录终止子和(4)可选择标志,从而以至少50mg/L培养基的浓度得到重组人载脂蛋白A-II多肽。
2.根据权利要求1的方法,其中所说的甲基营养酵母是巴斯德毕赤酵母,并且所说的甲基可诱导的启动子和转录终止子均来自巴斯德毕赤酵AOX1基因。
3.根据权利要求1的方法,用于表达重组人载脂蛋白A-II的甲基营养酵母能够依靠作为碳源和能源的甲醇生长,并且该酵母是被包括甲基可诱导的转录启动子、编码人载脂蛋白A-II的DNA片段、转录终止子和可选择标志的DNA构建体转化的。
4.用于在甲基营养酵母中表达重组人载脂蛋白A-II的DNA构建体,该构建体包括可操作连接的元件:甲基可诱导的转录启动子、编码人载脂蛋白A-II的DNA片段、转录终止子和可选择标志。
5.根据权利要求4的构建体,其中所说的甲基营养酵母是巴斯德毕赤酵母,并且甲基可诱导的启动子和转录终止子均来自巴斯德毕赤酵母AOX1基因。
6.纯化载脂蛋白A-II的方法,特征在于依次使用阳离子交换层析和疏水层析技术分离。
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