[发明专利]一种测定畜牧粪便中抗生素的方法

权利要求书

1.一种测定畜牧粪便中抗生素的方法，用于检测鸡粪便，其特征在于所述方法 包括以下步骤：

提取过程：称取0.5g冷冻干燥后的鸡粪便样品到聚四氟乙烯萃取罐中，加入0.1M EDTA-McIlvaine缓冲液15ml，用微波辅助萃取仪提取15min，将萃取后得到的悬浊液 转移到离心管中，然后重新加入缓冲液再萃取一次，两次提取的悬浊液转移到同一离 心管中冷冻离心30min；

浓缩纯化过程：离心后的鸡粪便的上清液通过固相萃取小柱，用甲醇脱洗小柱， 然后用氮气吹去甲醇溶剂，定容到1ml；定容后的样品，再通过聚四氟乙烯过滤膜，进 一步纯化样品；

测定过程：纯化后的样品直接进入液相色谱串联质谱仪测定。

2.一种测定畜牧粪便中抗生素的方法，用于检测猪粪便，其特征在于所述方法 包括以下步骤：

提取过程：称取0.5g质量冷冻干燥后的猪粪便样品到聚四氟乙烯萃取罐中，加入 甲酸酸化的乙腈，Ph＝4提取液15ml，用微波辅助萃取仪提取15min，将萃取后得到的悬浊 液转移到离心管中，然后重新加入缓冲液再萃取一次，两次提取的悬浊液转移到同一 离心管中冷冻离心30min；

浓缩纯化过程：离心后的猪粪便上清液经氮气吹到约5ml的时候，加入200ml蒸馏 水稀释，通过固相萃取小柱，用甲醇洗脱小柱，然后用氮气吹去甲醇溶剂，再用甲醇 定容到1ml；定容后的样品，再通过聚四氟乙烯过滤膜，进一步纯化样品；

测定过程：纯化后的样品直接进入液相色谱串联质谱仪测定。

3.根据权利要求1或2所述的测定畜牧粪便中抗生素的方法，其特征在于所述微波 辅助萃取仪提取温度40℃，功率200w，压力2.0apm。

4.根据权利要求1或2所述的测定畜牧粪便中抗生素的方法，其特征在于所述浓 缩纯化过程中的固相萃取小柱是：先用15ml超纯水活化，然后通过10ml甲醇，最后用 15ml超纯水洗掉小柱上残留的甲醇，样品以2ml/min的速度通过固相萃取小柱，然后用 12ml甲醇脱洗。

5.根据权利要求1或2所述的测定畜牧粪便中抗生素的方法，其特征在于所述氮 气吹去甲醇溶剂时温度设定为30℃。

6.根据权利要求1或2所述的测定畜牧粪便中抗生素的方法，其特征在于所述浓 缩纯化过程中的聚四氟乙烯过滤膜是0.45μm聚四氟乙烯过滤膜。

7.根据权利要求1或2所述的测定畜牧粪便中抗生素的方法，其特征在于所述液 相色谱串联质谱仪测定流动相使用0.25％甲酸和乙腈的混合液。