[发明专利]一种碱性果胶酶基因工程菌培养条件的优化方法有效
申请号: | 200910070737.X | 申请日: | 2009-10-09 |
公开(公告)号: | CN101781641A | 公开(公告)日: | 2010-07-21 |
发明(设计)人: | 路福平;郝育杰;刘逸寒;王春霞;肖静;周浩;蒋彦洁;王珊 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | C12N9/26 | 分类号: | C12N9/26;C12R1/125 |
代理公司: | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人: | 王来佳 |
地址: | 300457 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 碱性 果胶酶 基因工程 培养 条件 优化 方法 | ||
1.一种碱性果胶酶基因工程菌培养条件的优化方法,其特征在于:步骤如下:
(1)采用单因素实验对碱性果胶酶基因工程菌的发酵培养基组成进行优化,得到初步优化 的发酵培养基;
(2)通过响应面方法对优化的发酵培养基再进一步优化,得到目标菌种优化培养基;
(3)对目标菌种优化培养基进行发酵培养条件优化,得到优化培养条件,
所述单因素实验对碱性果胶酶基因工程菌的发酵培养基组成进行优化的步骤为:
(1)不同碳源及浓度对产酶的影响,确定最佳碳源以及最佳添加量;
(2)不同氮源及浓度对产酶的影响,确定最佳氮源以及最佳添加量;
(3)不同金属离子和无机盐及其浓度对产酶的影响,确定最佳金属离子和无机盐的种类以 及最佳添加量,
所述响应面方法对培养基进行优化的步骤为:
(1)根据Plackett-Burman法设计实验步骤及运用minitab软件进行数据分析;
(2)确定因素水平:根据Plackett-Burman实验结果设计的爬坡实验,筛选出对产酶有重要 影响的因素;
(3)采用中心组合设计实验优化培养基组成:根据Box-Benhnken的中心组合设计原理和爬 坡实验所得结果设计响应面分析实验,对重要因素进行优化,最终确定的发酵培养基组成,
所述目标菌种优化培养基进行发酵培养条件优化的步骤为:在优化培养基条件下,采用 单因素实验对碱性果胶酶基因工程菌发酵培养条件进行优化,确定最佳目标菌种的最佳发酵培 养条件。
2.根据权利要求1所述的一种碱性果胶酶基因工程菌培养条件的优化方法,其特征在于: 所述发酵培养条件包括:菌种种龄、初始pH、接种量、发酵温度和摇瓶转速。
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