[发明专利]胆汁三烯结合蛋白(BBP)的序列优化和高效表达无效
申请号: | 200910070956.8 | 申请日: | 2009-10-26 |
公开(公告)号: | CN102040657A | 公开(公告)日: | 2011-05-04 |
发明(设计)人: | 宁保安;高志贤;孙思明;王红勇;王彩红 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院卫生学环境医学研究所 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C12N15/12;C12N15/70;C12P21/02;C12R1/19 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 300050*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 胆汁 结合 蛋白 bbp 序列 优化 高效 表达 | ||
1.一种胆汁三烯结合蛋白(BBP)分子,其特征在于优化后的BBP序列与原序列相比,57个碱基被替换,序列中所有的大肠杆菌低频密码子均被高频密码子所替换。
2.根据权利要求1的胆汁三烯结合蛋白(BBP)分子,其特征在于具有序列表中序列1所示的碱基序列。
3.编码权利要求1的胆汁三烯结合蛋白(BBP)分子的基因,其特征在于具有序列表中序列2所示的核苷酸序列。
4.权利要求1或2所述的胆汁三烯结合蛋白(BBP)分子的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)对野生型BBP序列的优化设计与引物合成;
(2)PCR合成优化后BBP序列并与表达载体pBV-220连接,构建pBV-220BBP表达载体;
(3)在大肠杆菌DH5α中进行高效表达;
(4)胆汁三烯结合蛋白(BBP)分子的分离纯化;
5.根据权利要求4的制备方法,其特征在于步骤(2)所述表达载体是pBV220。
6.根据权利要求4的制备方法,其特征在于步骤(3)所述大肠杆菌是E.coli DH5α。
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