[发明专利]一种新西伯利亚银白杨的微繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种微繁方法。 

背景技术

新西伯利亚银白杨(P.bachofenii×P.pyramidalis ROZ)原产俄罗斯，是经过俄罗斯几代科学家的艰苦努力培育而成的、极耐高寒、高温的优质速生树种，而且具有优良的观赏性和较强的耐盐碱和耐旱能力，一般十几年内即可成材利用，是制造纸浆和胶合板的良好原料，同时也是用于生态建设，环境保护等方面的重要树种之一。 

新西伯利亚银白杨于2004年由俄罗斯西伯利亚引进我国，引进时为数量有限的嫩枝茎端，经过扦插繁殖得到的苗木在黑河地区可以安全越冬，无任何冻害发生，结束了我国北方城市没有高纬寒地耐寒速生杨树品种的历史，具有很大的发展空间。黑河地区已经计划在短期内(2010年前)培育出优质速生杨树苗木100万株，用于高产高效人工林基地建设，但是由于引进的嫩茎数量有限，且扦插繁殖新西伯利亚银白杨的周期长，至少需要6个月，增殖效率低，成本高，远远不能满足市场的需要，这使新西伯利亚银白杨在我国境内的推广栽培和资源利用受到了极大的限制。目前，有利用杨树叶片诱导产生不定芽的繁殖技术，但是存在产生的后代变异大，遗传稳定性差的问题。 

发明内容

本发明的目的是为了解决新西伯利亚银白杨繁殖周期长、增殖效率低、成本高和遗传稳定性差的问题，而提供的一种新西伯利亚银白杨的微繁方法。 

新西伯利亚银白杨的微繁方法按以下步骤实现：一、将清洗后的新西伯利亚银白杨外植体在超净工作台上用质量浓度为75％的乙醇溶液浸泡60s后再用另一份质量浓度为75％的乙醇溶液浸泡60s，然后用无菌水冲洗3～5次，再用质量浓度为0.1％的氯化汞溶液消毒12～15min，然后用无菌水冲洗3～5次；二、将消毒后的外植体切割成带有1个顶芽或1～2个腋芽、且长度为1～2cm的茎段，然后接种于诱导培养基中，在温度为25～28℃、湿度为70％～80％、光照强度为40～60μmol·cm^-2·s^-1、每天光照16～18h的条件下培养至无菌芽生长长度为0.5～1cm；三、将经过步骤二处理和培养并增生出无菌芽的外植体连同增生的无菌芽一起转接于继代培养基中，在温度为25～28℃、湿度为70％～80％、光照强度为40～60μmol·cm^-2·s^-1、每天光照16～18h的条件下培养至无菌芽生长长度为2～5cm，即为微枝(无根试管苗)；四、将每个微枝从茎段上单独切离，然后接种于增壮培养基中，在温度为25～28℃、湿度为70％～80％、光照强度为40～60μmol·cm^-2·s^-1、每天光照16～18h的条件下培养至微枝生长长度为4～6cm；五、将增壮后的微枝切割成带有1个顶芽或1～2个腋芽、且长度为1～2cm的茎段，然后逐段接种于增殖培养基中培养至微枝生长长度为4～6cm，再扦插于生根基质中进行生根培养后即完成新西伯利亚银白杨的微繁；其中步骤二中诱导培养基是以改良MS固体培养基为基本培养基，且还包含0.5～1.0mg/L的6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、0.05～0.1mg/L的奈乙酸(NAA)和质量浓度为2.5～3.0％的蔗糖，pH值为5.6～6.0；步骤三中继代培养基是以改良MS固培养基为基本培养基，且还包含0.1～0.3mg/L的6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、0.05～0.1mg/L的奈乙酸(NAA)和质量浓度为2.0～2.5％的蔗糖，pH值为5.6～6.0；步骤四中增壮培养基是以MS固培养基为基本培养基，且还包含质量浓度为2.0～2.5％的蔗糖，pH值为5.6～6.0；步骤五中增殖培养基是以改良MS固培养基为基本培养基，且还包含0.1～0.3mg/L的6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、0.05～0.1mg/L的奈乙酸(NAA)和质量浓度为2.0～2.5％的蔗糖，pH值为5.6～6.0；步骤五中生根基质按体积比由25％的草炭土、30％的蛭石和45％的珍珠岩组成，生根基质含水量为50％～60％。

本发明中新西伯利亚银白杨的微繁，繁殖周期短，效率高，其增殖效率可达30倍，而且利用母株上原有的顶芽或腋芽直接进行芽的增殖，所产生的后代遗传稳定性好；增殖培养后的微枝在试管外不需要任何化学试剂和植物激素可直接生根成完整的再生植株，生根和驯化同时进行，省工省时，成本低，且生根率和移苗成活率均可达100％，实现了新西伯利亚银白杨的快速、高效繁殖及大规模推广种植的目标。 

具体实施方式