[发明专利]人干扰素α-2b与人胸腺素α1的融合蛋白及其制备

权利要求书

1.一种融合蛋白，其特征在于：具有人干扰素α-2b功能的多肽和具有入胸腺素α1功能的多肽融合，其连接方式为：T α1-M-IFN α-2b-T α1、IFNα-2b-Tα1。其中，T α1代表人胸腺素α1，IFN α-2b代表人干扰素α-2b，M代表连接肽。

2.权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：融合蛋白T α1-M-IFN α-2b-T α1，在T α1与IFN α-2b之间加上了一段连接肽，该连接肽的形式为0-8个氨基酸，最优化的形式是4-5个氨基酸。

3.权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于：融合蛋白IFN α-2b-T α1，在IFNα-2b和T α1之间不存在连接肽，并不影响该蛋白的表达及活性。

4.权利要求2所述融合蛋白的DNA，其特征在于：其氨基酸密码子可以是其简并密码子的任意一个。

5.权利要求3所述融合蛋白的DNA，其特征在于：其氨基酸密码子可以是其简并密码子的任意一个。

6.一种表达载体，其特征在于：它含有权利要求4和权利要求5所述DNA中的一种。

7.权利要求6所述表达载体，是真核细胞表达载体和原核细胞表达载体，优选PET系列载体。

8.一种宿主细胞，其特征在于：它含有权利要求9的载体。

9.权利要求8所述宿主细胞，是动物细胞、酵母、大肠杆菌，优选大肠杆菌。

10.一种融合蛋白的纯化方法，其特征是包含以下的步骤：在PH4.5的条件下，使用醋酸-醋酸钠缓冲液，利用阳离子层析介质在低浓度氯化钠条件下上样，高浓度氯化钠条件下洗脱纯化；然后在PH8.2的条件下，使用Tris-HCl缓冲液，利用阴离子层析介质进一步纯化，获得纯度95％以上样品。