[发明专利]一种从木豆根茎中提取、分离和纯化染料木素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及从植物中提取、分离和纯化活性性成分的一种方法，具体是从木豆的新鲜或干燥根茎中提取、分离和纯化染料木素。

背景技术

染料木素(Genistein)是一种异黄酮类化合物，广泛存在于豆科植物中，是一种雌激素样化合物。在体内代谢中它能与内源性雌激素受体结合发挥雌激素样作用，被称为植物性雌激素类药物。医药中主要用于治疗由缺乏雌激素引起的妇女病和老年性骨质疏松症。在当今世界范围内，由于人口老龄化，骨质疏松症等老年疾病发病率呈上升趋势，雌激素类药物作为骨质疏松治疗的主要药物有着良好的市场销售前景。异黄酮类雌激素只有苷原形式才有雌激素活性，染料木素为异黄酮的苷原，易吸收，吸收至人体后可直接发挥作用，无需象大豆异黄酮中大多数苷在体内代谢后才可起作用，临床使用排除了吸收不完全和吸收后体内水解不完全等因素，提高了药物利用度，减少了对疗效的干扰。此外，染料木素还在抗肿瘤(SanjeevBanerjee et al，2005)、抗氧化(Huachen Wei et al，1998)、降血脂(金永生等，2002)、体外抗肝纤维化(Qi Lihong et al，2001)、雌激素作用和抗雌激素作用(郑杰等，1998)等方面具有明显的生物活性，估计随着研究的深入，有关染料木素的研究和开发将成为倍受人们关注的新热点。染料木素的开发应用具有良好的发展前景。但是，有关提纯工艺的文献报道很少，已有的提取纯化染料木素的方法主要是传统的醇提取、柱层析纯化。传统的提纯过程漫长且目标化合物损失较多，采用多次硅胶柱层析，操作步骤繁多且洗脱液以氯仿、丙酮、乙酸乙醋等毒性较大、价格较高的试剂为主。中国专利“染料木素的提取方法”(公开号CNl465571)中采用传统的醇提、浓缩、水沉、回流、抽滤、加热回流水解等方法得到染料木素，此法不够精细、有机溶剂用量大、产品杂质含量高、得率低。王凤芹(2007年)等采用传统的柱层析方法分离得到染料木素，历时长，得率低。为此，有必要寻找来源丰富的原料和提取简单、成本低廉的制备工艺，以供大量生产，为染料木素作为药品的开发提供条件。目前，作为提取染料木素的原料主要为豆类作物和齿状植物，据文献报道染料木素在主要原料中的含量为：葛根：0.065％-0.078％；槐角：0.5％-1％；红车轴草：0.3％左右；豆豉：0.34％左右；大豆：0.04％-0.24％。国内外的研究普遍认为大豆是染料木素的重要食物来源，但由于分离条件、手段等多种因素影响，大豆异黄酮中各种活性成分分离难度较大、分离成本高，而且大量实验研究证明大豆中的染料木素含量较低，成品收率约为原料的0.04％，因此，用大豆作为原料很难产生较大的开发价值。

为了克服上述问题，本发明人通过多年来对木豆的实验研究，发现从木豆根茎中可提取含量较高的染料木素，并且木豆是迄今为止世界上唯一一种食用木本且用途最多的豆类作物。因此，木豆可作为一种生产染料木素的理想原料。

木豆[Cajanus cajan(L.)Millsp.]，英文常用名为Pigeonpea，为蝶形花科热带或亚热带木本植物、常绿灌木。又名树豆、千年豆等，其根、茎、叶、化、荚全身是宝，综合价值极高，除具有显著的药用价值外，还具有很高的经济、生态利用价值。作为一种民间用药它具有清凉、消热、解毒、止痛止血、抑菌消炎等功效，常用于治疗外伤、烧伤、感染、褥疮和抗菌消炎等(刘中秋等，1998；孙绍美等，1995)。此外，木豆提取物制剂在印度、巴西、古巴、墨西哥、南非等国用于治疗感冒、支气管炎、麻疹、痢疾、肝炎、皮肤病、烧伤、溃疡、肿瘤等疾病(Abbiw DK.，1990；Duke JA.et al，1994；Milliken W.，1997；Graver JK.，2002)，疗效显著。我国临床组方用于治疗股骨头坏死以及循环系统疾病(袁浩等，2004)。

现在已知的木豆中活性成分包括芹菜素、木犀草素、牡荆苷、异牡荆苷、木豆素、木豆素A、木豆素C、球松素、染料木素、水杨酸、β-谷甾醇、柚皮素-4’、7-二甲醚、三十一烷、二十一烷、Cajanol和一些挥发油类成分(林励等，1999；Christopher JC.et al，1982；程赫青等，1992)。其中木豆根茎中的染料木素含量可达到原料的2％左右，且原料资源丰富、活性突出，具有良好的保健品和药用开发前景。