[发明专利]大环内酯类化合物及其制备方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及的是一种抗生素，具体地说是一种大环内酯类抗生素。本发明还涉及这种抗生素的制备方法。

(二)背景技术

目前，国内外应用广泛的大环内酯类农用抗生素多拉菌素属双糖类化合物，是以环已氨羧酸(cyclohexanecarboxylic)为前体，通过基因重组的阿维链霉菌(streptomyces avermitilis strainNEAU1069)新菌株发酵而成的一种阿维菌素类抗生素，最早发现它驱杀寄生虫的能力是在驱鼠继代的蛇形毛圆线虫和杀兔痒螨的动物模型中(参见Goudie，AC.等人，VeterinaryParasitology.49(1993)5-15)。多拉菌素为内外兼杀剂，对线虫、节肢动物均有良好的驱杀效果，与市售的伊维菌素类产品比较，其抗生寄虫范围更广泛、血药浓度高峰维持时间更长、半衰期也相对较长。而且多拉菌素在动物体内持效时间更长，是目前最具有开发潜力的兽用抗寄生虫药物之一。

(三)发明内容

本发明的目的是提供一种具有强的抗寄生虫及其虫卵的活性，可用以控制动物体内外寄生虫及其虫卵生存的大环内酯类化合物。

本发明的目的是这样实现的：

它的分子结构如下：

当X-Y...R为CH＝C...H时为新化合物1的结构；新化合物2的结构特征是X-Y...R为CH₂-CH...OH。

本发明的另一个目的是提供这种大环内酯化合物的制备方法。

本发明涉及的化合物是采用这样的方法来制备的：

1、发酵

(1)发酵菌种：发酵菌种是阿维链霉菌突变株(Streptomyces avermitilis strain NEAU1069)，由东北农业大学生物化工实验室提供，是于2009年03月11日保藏于“中国生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，保藏登记号为：CGMCC NO.2943，命名为NEAU1069(Streptomyces avermitilis)的菌株。

(2)斜面培养：采用YMS培养基(可溶性淀粉10g，酵母抽提物2g，KNO₃ 1g，琼脂20g，蒸馏水1000ml，pH值7.0)于121℃下灭菌20min，接菌后在28℃下培养6-8d；

(3)种子培养：培养基(葡萄糖20g，大豆粉15g，酵母粉5.0g，蒸馏水1000ml，pH值7.0)，用250ml的三角瓶每瓶分装25ml，然后用10ml无菌水将斜面的冰城链霉菌孢子洗下并制成孢子悬浮液，使其浓度为1×10⁷～1×10⁸个/ml。每瓶加2ml孢子悬浮液，置于摇床上，转速250r/min，28℃培养24h；

(4)发酵：采用液体摇瓶发酵，培养基(玉米粉10％，大豆粉1％，棉花籽粉1％，α-淀粉酶0.02％，NaCl 0.1％，K₂HPO₄ 0.2％，MgSO₄·7H₂O 0.1％，CaCO₃ 0.7％，环己烷羧酸盐0.1％，pH7.0，加蒸馏水1000ml。于121℃下灭菌20min，分装于1000ml三角瓶，每瓶100ml。接种量8％(V/V)，摇床转速250r/min，28℃振荡培养12-13d。

2、发酵液处理

(1)发酵液经100～200目筛网过滤后，滤渣用甲醇提取。

(2)将得到的浸提液浓缩至一定体积后进行溶剂萃取，硅胶柱层析和RP-18层析后，得到两种无色的粉末状化合物。

本发明还涉及结构表征如下化合物：化合物1

化合物1的物理化学性质如下：

性状(Appearance)：白色粉末

溶解性(Solubility)：易溶于氯仿、丙酮、甲醇

比旋度(Specific rotation)：[α]_D²⁵+123.86(c 0.088，EtOH)；

分子式(Molecular formula)：C₃₅H₄₆O₆

ESIMS m/z：563[M+H]⁺，High-resolution ESIMS：585.3102[M+Na]⁺(calcd for C₃₅H₄₆O₆Na，585.3187)；