[发明专利]一种新的制备脑蛋白水解物的方法

权利要求书

1.一种从哺乳动物脑组织中制备脑蛋白水解物的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)胃酶液水解：取新鲜冷冻的哺乳动物脑组织，加纯化水或注射用水匀浆，匀浆液加入胃酶液搅拌均匀，水解，水解完毕加热微沸，过滤，得胃酶水解液；

(2)胰酶水解：胃酶水解液，加入胰酶，搅拌均匀，水解，过滤，得脑蛋白水解物粗提液；

(3)除碱性蛋白；

(4)超滤分离；

(5)纳虑浓缩；

(6)检查细菌内毒素，得脑蛋白水解物精制品。

2.如权利要求1所述的脑蛋白水解物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)胃酶液水解：取新鲜冷冻的哺乳动物脑组织，缓化，按照1∶1～2的比例加纯化水或注射用水，胶体磨匀浆，匀浆液加热80～90℃，保温10～20min，降温至35～40℃，调pH值为2.5～3.5，加入胃酶液搅拌均匀，37～45℃水解12～18h，水解完毕，加热微沸10min，100目滤布过滤，得胃酶水解液；

(2)胰酶水解：胃酶水解液调节pH值7.5～8.5，加入胰酶(按原料1％加入)加入激活剂，0.04mol/LCaCl₂室温放置1小时加入胃酶水解液中，再用5mol/L NaOH调节pH值为7.5-8.0，45～55℃水解4h，水解完毕，调节pH值为4.0～5.0，按原料总量加入1％活性炭100℃加热15min，用100目滤布过滤，得脑蛋白水解物粗提液；

(3)除碱性蛋白：取脑蛋白水解物粗提液，调节pH值为9.0～10.0，加热80～90℃，保温10min，降温30℃以下，用滤纸过滤，得滤液；

(4)超滤分离：将(3)中所得滤液调pH值为6.5～7.5，用10000分子量的超滤柱超滤，超滤液冷冻48h；

(5)纳滤浓缩、活性炭处理：将(4)中所得冷冻的超滤液缓化，用0.8μm滤膜过滤，除去溶液中脂肪蛋白及杂蛋白，过滤液纳滤，纳滤液用6mol/LLHcl调pH值为4.0～5.0，并加入0.1～0.4％活性炭(w/w)，充分搅拌下100℃保温10～40min，0.45μm微孔滤膜过滤，滤液补加两种注射用氨基酸。

(6)检查细菌内毒素：将(5)中所得滤液调整pH值为7.0～7.5，再经10000分子量的超滤柱超滤，超滤液取样检查细菌内毒素，合格后，得脑蛋白水解物精制品。

3.如权利要求1或2制备的脑蛋白水解物，其特征在于，含有活性多肽10～12mg/mL和唾液酸0.1～0.2mg/mL。

4.如权利要求2(5)(6)所述的脑蛋白水解物与一种或多种药用载体和/或稀释剂制的药物组合物，可以制成药学上可接受的任一剂型。

5.如权利要求2(5)(6)所述的脑蛋白水解物在制备治疗和/或预防脑功能障碍的药物中的应用。