[发明专利]接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法

权利要求书

1.接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法，包括以下步骤：

1)对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品适量，精密称定，以甲醇溶解，再用甲醇和1.5～2.5％的醋酸溶液稀释，配制成一定柚皮苷浓度的对照品溶液；

2)供试品溶液的制备：取处理过的接骨续筋制剂样品适量，精密称定，加甲醇适量，超声提取，再用甲醇和1.5～2.5％的醋酸溶液稀释，配制成与对照品溶液柚皮苷浓度相适应的供试品溶液，用0.45μm微孔滤膜滤过；

3)采用高效液相色谱法进行测定，其色谱条件为：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；

流动相：甲醇∶1.5～2.5％醋酸溶液＝35∶65～40∶60；

柱温：35～45℃；

检测波长：283nm；

4)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，测定柚皮苷色谱峰的峰面积；

5)以外标法计算接骨续筋制剂样品中的柚皮苷含量；

其中，制备成的对照品溶液与供试品溶液中的溶媒应满足甲醇∶1.5～2.5％醋酸溶液＝1∶0.8～1.3；

以上百分浓度均为质量百分浓度。

2.根据权利要求1所述的接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法，其特征是包括以下步骤：

1)对照品溶液的制备：精密称取柚皮苷对照品适量，置适当的量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取amL，置bmL量瓶中，加甲醇cmL，并满足a+c＝0.5b；再用1.5～2.5％醋酸溶液稀释至刻度，配制成一定柚皮苷浓度的对照品溶液；

2)供试品溶液的制备：精密称取处理过的接骨续筋制剂样品适量，置具塞锥形瓶中，加甲醇25mL，称定重量，超声处理30min，冷却至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置10mL量瓶中，加1.5～2.5％醋酸溶液稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，配制成与对照品溶液柚皮苷浓度相适应的供试品溶液；

3)采用高效液相色谱法进行测定，其色谱条件为：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；

流动相：甲醇∶1.5～2.5％醋酸溶液＝35∶65～40∶60；

柱温：35～45℃；

检测波长：283nm；

4)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，测定柚皮苷色谱峰的峰面积；

5)以外标法计算接骨续筋制剂样品中的柚皮苷含量；

以上百分浓度均为质量百分浓度。

3.根据权利要求1或2所述的接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法，其特征是每1mL对照品溶液中含柚皮苷10～60μg。

4.根据权利要求1或2所述的接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法，其特征是每1mL对照品溶液中含柚皮苷约30μg。

5.根据权利要求1或2所述的接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法，其特征是所述接骨续筋制剂是接骨续筋片、接骨续筋胶囊、接骨续筋颗粒剂中的一种。

6.根据权利要求1或2所述的接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法，其特征是所述柚皮苷的含量是接骨续筋制剂中骨碎补所含柚皮苷的量。

7.根据权利要求1或2所述的接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法，其特征是所述的流动相优选甲醇∶1.5～2.5％醋酸溶液＝38∶62。

8.根据权利要求1或2所述的接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法，其特征是流动相的流速为0.8～1.2mL·min^-1。

9.根据权利要求1或2所述的接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法，其特征是所述的柱温优选40℃。