[发明专利]接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法

说明书

技术领域

本发明属于中成药含量测定技术领域，涉及一种含骨碎补的中成药含量测定方法，特别是涉及接骨续筋制剂中骨碎补的含量测定。本发明具体是以骨碎补中的柚皮苷作为指标成分计的含量测定方法。

背景技术

接骨续筋片收载于卫生部药品标准《中药成方制剂》第11册第170页，标准编号WS₃-B-2226-96，处方为蜥蜴500g、骨碎补333g、穿山龙167g，剂型为糖衣片，功能活血化瘀、消肿止痛，主治软组织损伤、骨折等，但缺乏含量测定方法。

骨碎补是接骨续筋片(糖衣片)以及按照接骨续筋片处方制成的薄膜衣片、分散片、胶囊、颗粒剂等接骨续筋制剂的主要药味，而柚皮苷是骨碎补的主要成分之一，且性质稳定。因此，以柚皮苷含量作为接骨续筋制剂的质量控制指标是一种行之有效的办法。

发明内容

本发明的目的是提供一种接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法，本发明利用高效液相色谱法测定接骨续筋制剂中的柚皮苷含量，以提高接骨续筋制剂的质量标准。

本发明接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法包括以下步骤：

1)对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品适量，精密称定，以甲醇溶解，再用甲醇和1.5～2.5％的醋酸溶液稀释，配制成一定柚皮苷浓度的对照品溶液；

2)供试品溶液的制备：取处理过的接骨续筋制剂样品适量，精密称定，加甲醇适量，超声提取，再用甲醇和1.5～2.5％的醋酸溶液稀释，配制成与对照品溶液柚皮苷浓度相适应的供试品溶液，用0.45μm微孔滤膜滤过；

3)采用高效液相色谱法进行测定，其色谱条件为：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；

流动相：甲醇∶1.5～2.5％醋酸溶液＝35∶65～40∶60；

柱温：35～45℃；

检测波长：283nm；

4)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，测定柚皮苷色谱峰的峰面积；

5)以外标法计算接骨续筋制剂样品中的柚皮苷含量；

其中，制备成的对照品溶液与供试品溶液中的溶媒应满足甲醇∶1.5～2.5％醋酸溶液＝1∶0.8～1.3。

进一步地，本发明的接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法包括：

1)对照品溶液的制备：精密称取柚皮苷对照品适量，置适当的量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取amL，置bmL量瓶中，加甲醇cmL，并满足a+c＝0.5b；再用1.5～2.5％醋酸溶液稀释至刻度，配制成一定柚皮苷浓度的对照品溶液；

2)供试品溶液的制备：精密称取处理过的接骨续筋制剂样品适量，置具塞锥形瓶中，加甲醇25mL，称定重量，超声处理30min，冷却至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置10mL量瓶中，加1.5～2.5％醋酸溶液稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，配制成与对照品溶液柚皮苷浓度相适应的供试品溶液；

3)采用高效液相色谱法进行测定，其色谱条件为：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；

流动相：甲醇∶1.5～2.5％醋酸溶液＝35∶65～40∶60；

柱温：35～45℃；

检测波长：283nm；

4)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪，测定柚皮苷色谱峰的峰面积；

5)以外标法计算接骨续筋制剂样品中的柚皮苷含量；

以上百分浓度均为质量百分浓度。

本发明接骨续筋制剂中的柚皮苷含量测定方法中：

所述的对照品溶液为每1mL含10～60μg柚皮苷的溶液，优选每1mL含约30μg柚皮苷的溶液。

所述的流动相比例可以适当调整，但优选甲醇∶1.5～2.5％醋酸溶液＝38∶62；流动相的流速为0.8～1.2mL·min^-1，优选1.0mL·min^-1。

所述的柱温优选40℃。

进样量一般为10μL或20μL。

本发明中，所述对照品溶液和供试品溶液的柚皮苷浓度可做适当调整，但要与进样量相结合，以符合线性浓度范围。

本发明中所述的接骨续筋制剂是指接骨续筋片(糖衣片、薄膜衣片、分散片)、接骨续筋胶囊、接骨续筋颗粒剂等任何药剂学中所述的剂型。

所述的接骨续筋制剂中柚皮苷的含量，是指接骨续筋制剂中骨碎补所含柚皮苷的量。