[发明专利]一种自然杀伤细胞及其培养方法

权利要求书

1.保藏编号为CGMCC No.2901的人自然杀伤细胞NKG细胞。

2.一种制备权利要求1所述细胞的方法，是用细胞培养基培养权利要求1中所述细胞；所述细胞培养基为含终浓度为1.5mM-2.5mM的L-谷氨酰胺、终浓度为2.0g/L-2.4g/L的碳酸氢钠、终浓度为5.0mg/L-9.0mg/L的核糖核苷、终浓度为5.0mg/L-9.0mg/L的脱氧核糖核苷、终浓度为8.0％-12.5％(体积百分含量)的新生牛血清、终浓度为8.0％-12.5％(体积百分含量)的马血清、终浓度为5.0×10⁴IU/L-1.25×10⁵IU/L的人白细胞介素2的α-MEM液体培养基；所述终浓度为各物质在所述细胞培养基中的浓度。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述L-谷氨酰胺的终浓度为2.0mM，所述碳酸氢钠的终浓度为2.2g/L，所述核糖核苷的终浓度为7.0mg/L，所述脱氧核糖核苷的终浓度为7.0mg/L，所述新生牛血清的终浓度为10％(体积百分比)，所述马血清的终浓度为10％(体积百分比)，所述人白细胞介素2的终浓度为1.0×10⁵IU/L。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述培养的方式为摇袋式培养；所述摇袋式培养的摆动速度为4rpm-10rpm，摆动幅度为3°-9°。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述摇袋式培养的摆动速度为7rpm，摆动幅度为7°。

6.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述培养的条件为温度为35℃-37℃、空气中CO₂体积含量为4.0％-10％、CO₂流速为0.10L/min-0.25L/min。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述培养的条件为温度为37℃、空气中CO₂体积含量为5.0％、CO₂流速为0.15L/min。

8.一种制备权利要求1所述细胞的液体制剂的方法，包括如下步骤：1)用权利要求2所述方法培养所述细胞；2)用γ射线对所述步骤1)中得到的细胞进行辐照；

所述辐照的剂量为800cGy-1200cGy；

所述辐照的速率为50cGy/min-200cGy/min。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述辐照的剂量为800cGy；所述辐照的速率为50cGy/min。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于：所述液体制剂为注射剂。

11.由权利要求8-10中任一所述方法得到的细胞液体制剂。