[发明专利]快速筛选高表达目的蛋白的酵母的方法

权利要求书

1.筛选高表达目的蛋白的酵母的方法，包括如下步骤：是将载体导入酵母菌中获得重组菌，所述重组菌在含有可溶性淀粉的固体培养基上培养，单克隆周围产生直径为0.3-1.0cm透明圈的重组菌为高表达目的蛋白的酵母；所述载体包含原核复制起点、筛选标记基因表达盒和目的基因表达盒；所述目的基因表达盒自上游至下游依次含有启动子、目的基因和终止子；所述筛选标记基因表达盒自上游至下游依次含有启动子、酸性α-淀粉酶的编码基因和终止子。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述筛选标记基因表达盒还含有两个loxP序列；所述酸性α-淀粉酶的编码基因位于所述两个loxP序列之间。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述载体还含有血红蛋白基因表达盒，所述血红蛋白基因表达盒自上游至下游依次含有FMD启动子、血红蛋白基因和终止子。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述载体还含有抗性基因表达盒，所述抗性基因表达盒自上游至下游依次含有loxP序列、抗性基因和loxP序列。

5.根据权利要求1至4中任一所述的方法，其特征在于：所述方法中，还包括将Cre重组酶基因导入所述重组菌中的步骤。

6.根据权利要求1至4中任一所述的方法，其特征在于：所述酸性α-淀粉酶是由序列表中序列5所示的氨基酸序列组成的蛋白质。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述酸性α-淀粉酶的编码基因的核苷酸序列是序列表中序列4。