[发明专利]靶向血小板的水蛭素聚离子胶束组合物

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于注射的靶向血小板的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-聚乙 二醇-壳聚糖(RGD-PEG-CS)包载水蛭素的聚离子胶束组合物及其制备方法。

背景技术

心脑血管疾病是三大致死性疾病之一，其中血栓栓塞是多种心脑血管疾病 发病的原因。由于动脉硬化、血管内皮损伤、内外凝血系统异常或血流动力学 异常等原因的诱发，血液流动过程中的成分，在血管或心脏内膜表面形成半凝 块状物质，该物质即为血栓。针对血栓形成的多种机制，多种抗血栓药物相继 问世，其中既有抑制血栓形成(抗凝防栓)和血小板聚集(抗血小板)的药物， 又有溶栓的药物。抗凝防栓及抗血小板药物在血栓形成的初始阶段，以及溶栓 治疗后的二次血栓预防过程中使用。针对血栓形成前和溶栓后，临床主要使用 肝素、华发林等抗凝剂联合阿司匹林等抗血小板药物。但上述药物多具有诱发 出血等副作用，临床安全性受到质疑。

水蛭素是由65个氨基酸构成的分子量为6950Da的单链多肽，具酸性氨基酸， 等电点为3.8。上世纪中期由markwardt从水蛭的唾液腺中提取出来，是迄今为 止最强的凝血酶抑制剂，具有直接抗凝、间接抗血小板和间接促纤溶的作用。 并以其高效性、专一性、无抗原性、低毒性、出血副作用小等赢得广泛关注。 1986年，基因发酵工程所得重组水蛭素的成功问世，以其相对较低的成本和相 对较高的产率，标志着水蛭素进入临床应用的可能。该药物可用于急性冠脉综 合征、链激酶溶栓的辅助治疗、深静脉血栓血管形成术、肝素诱发的血小板减 少、血液透析、弥散性血管内凝血等。但水蛭素的血浆半衰期短，缺乏组织特异 性，不能选择性地作用于病变部位，因此，临床上需要大剂量连续用药，易出 现出血等严重并发症，从而限制了其临床应用。增强溶栓剂的特异靶向性，是减 少药物用量、延长药物在体内作用时间和避免血栓再形成等的关键措施。

精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列(Arg-Gly-Asp，RGD)短肽是细胞膜整合素 受体与活化的血小板上IIb/IIIa球蛋白(GP IIb/IIIa)或其他细胞外配体相结 合的识别位点。静息血小板上，GP IIb/IIIa处于无活性状态，并不能与黏附 蛋白的RGD片段结合。然而一旦内皮受损，血小板黏附其上时，诱导剂(如凝血 酶，胶原，凝血酶敏感蛋白，ADP，血栓素A2等)与其相应受体结合后，通过 不同的细胞内信号传导机制调节GPIIb/IIIa的立体构型活化状态使之激活，提 高GP IIb/IIIa与纤维蛋白原的粘附能力，加速血小板的黏附与聚集。RGD三肽 作为导向激活血小板的靶分子，将抗凝防栓药物带到血栓附近，并竞争性结合 激活血小板上的GPIIb/IIIa，拮抗血小板与纤维蛋白的结合，降低血小板的黏 附与聚集。因此，RGD肽可作为血栓靶向制剂的导向弹头。CN101176785公开了 一种重组双功能水蛭素口服制剂及其制备方法，该专利对水蛭素进行了结构改 造，将RGD基因重组到水蛭素的基因上，通过发酵得到的抗凝、抗血小板双功能 重组水蛭素。但上述方法生产成本极高，并且改变了药物原有的化学组成。因 此，仍需要研制一种不改变原药的化学组成、制备工艺简单、体内循环时间长 且靶向作用于血小板的水蛭素组合物。

聚乙二醇接枝壳聚糖是壳聚糖的改良产物，在壳聚糖的氨基上引入亲水性 长链聚乙二醇，有效地提高了壳聚糖的水溶性和生物相容性，在聚离子引发剂 的作用下可在水溶液中自组装形成聚离子胶束。聚乙二醇接枝壳聚糖聚离子胶 束作为一种新型的药物载体，除具有传统聚合物胶束的特点：结构稳定、粒径 小且分布均匀；安全性好；制备工艺简单；易于贮存外，还具有自身的独特优 势：壳聚糖上大量的游离氨基在酸性环境下质子化，依靠静电作用与负电性药 物结合，形成胶束的疏水端，其上接枝的聚乙二醇在疏水内芯外形成致密的水 化外壳，可避免胶束被免疫系统摄取，延长药物在体内的循环时间，达到长循 环的目的。除此之外，聚离子胶束载药系统还具有包封率高、载药范围广泛， 载药过程基本在水溶液中进行，避免有机溶剂的使用，可消除溶剂残留引发的 毒副作用等优点。如果将RGD通过聚乙二醇与壳聚糖连接，可同时起到长循环 和靶向血小板两方面的作用。

发明内容

一方面，本发明提供一种靶向血小板的聚乙二醇接枝壳聚糖包载水蛭素的 聚离子胶束组合物。

另一方面，本发明提供靶向血小板的聚乙二醇接枝壳聚糖包载水蛭素的聚 离子胶束组合物用于注射给药的用途。