[发明专利]一种微通道式快速生物微粒计数方法无效
申请号: | 200910079321.4 | 申请日: | 2009-03-05 |
公开(公告)号: | CN101493399A | 公开(公告)日: | 2009-07-29 |
发明(设计)人: | 屈锋;任肖敏 | 申请(专利权)人: | 北京理工大学 |
主分类号: | G01N15/06 | 分类号: | G01N15/06;G01N21/33;G01N27/02;G01N21/64 |
代理公司: | 北京理工大学专利中心 | 代理人: | 张利萍 |
地址: | 100081北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 通道 快速 生物 微粒 计数 方法 | ||
1.一种微通道式快速生物微粒计数方法,其特征在于该方法的具体步骤如下:
1)将磷酸盐缓冲液清洗后的待测生物微粒中加入固定液固定处理1小时以上,再用磷酸盐缓冲液清洗细胞两次以上,除去剩余的固定液,得到固定化的细胞;通过对固定化后的生物微粒进行超声处理5秒~10秒,破坏生物微粒聚集现象;
其中,固定液为质量百分比为10%以上甲醛或质量百分比为4%以上多聚甲醛;细胞生物微粒体积与固定液的体积比为1∶10~1∶20;
2)将固定化后的生物微粒用磷酸盐缓冲液稀释到103~105个/ml的浓度范围内,将稀释后的生物微粒溶液以0.1~10μL/min的恒定流速通过微通道管路,生物微粒逐个通过紫外检测器后,在检测波长200~300nm下记录一定时间内检测的吸收峰数;
3)将上步数据代入公式C生物微粒=N/(S×T),求得生物微粒溶液的浓度;其中T为记录时间,N为T时间内所记录的峰数,S为生物微粒溶液在通道内的流速。
2.如权利要求1所述的一种微通道式快速生物微粒计数方法,其特征在于:所述紫外检测器替换为非接触电导检测器,检测通过微通道管的生物微粒,记录电导检测的峰数。
3.如权利要求1所述的一种微通道式快速生物微粒计数方法,其特征在于:所述紫外检测器替换为荧光检测器,检测通过微通道管的生物微粒,在生物微粒固定之前对其先进行荧光标记,记录荧光检测器所检测到的峰数。
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