[发明专利]重组肠病毒71型病毒样颗粒的制备方法有效
| 申请号： | 200910079374.6 | 申请日： | 2009-03-09 |
| 公开（公告）号： | CN101831410A | 公开（公告）日： | 2010-09-15 |
| 发明（设计）人： | 盛望;曾毅;周玉柏;李泽琳;蒋维 | 申请（专利权）人： | 北京工业大学 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/41;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/645;C12R1/78;C12R1/84;C12R1/865 |
| 代理公司： | 北京戈程知识产权代理有限公司 11314 | 代理人： | 程伟 |
| 地址： | 100124 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 肠病毒 71 病毒 颗粒 制备 方法 | ||
1.一种肠道病毒71型病毒样颗粒制备方法，该方法包括：
(1)优化肠道病毒71型病毒样颗粒P1基因及3CD基因序列；
(2)将优化的肠道病毒71型病毒样颗粒P1基因及3CD基因序列克隆到质粒中；
(3)用得到的质粒转化酵母细胞；
(4)从裂解的宿主细胞中分离重组肠道病毒71型病毒样颗粒。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述酵母细胞选自：酿酒酵母、多形汉逊酵母、巴斯德毕赤酵母、胞壁克鲁维氏酵母、乳克鲁维氏酵母或粟酒裂殖糖酵母。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述酵母细胞为酿酒酵母。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述的优化是指在不改变EV71 P1及3CD氨基酸序列的前提下，将P1及3CD基因序列的密码子替换为酵母细胞偏好的密码子。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述的密码子优化的肠道病毒71型病毒样颗粒P1基因序列和3CD基因序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的序列。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述的质粒为pESC-URA。
7.根据权利要求1所述的方法，其中所述的质粒为pESC-P1Y-3CDY。
8.一种如SEQ ID NO：1所示的肠道病毒71型病毒样颗粒P1基因序列。
9.一种如SEQ ID NO：2所示的3CD基因序列。
10.一种含有如权利要求8或9所述的基因序列的载体。
11.根据权利要求10所述的载体，其中所述的载体为pESC-URA。
12.一种含有如权利要求8或9所述的基因序列的酵母细胞。
13.根据权利要求12所述的酵母细胞，其中所述的酵母细胞选自：酿酒酵母、多形汉逊酵母、巴斯德毕赤酵母、胞壁克鲁维氏酵母、乳克鲁维氏酵母或粟酒裂殖糖酵母。
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