[发明专利]添加二甲基亚砜的长鞭红景天芽诱导培养基及制法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及添加二甲基亚砜(DMSO)的药用植物芽诱导培养基，特别涉及添加二甲基亚砜(DMSO)的长鞭红景天芽诱导培养基及其制备方法和用途。

背景技术

红景天有抗缺氧、抗寒冷、抗疲劳、抗微波辐射、延缓机体衰老，防止老年疾病等功效。它又是适应原样药物，在军事医学、航天医学、运动医学和保健医学等方面也有十分重要的意义。长鞭红景天(Rhodiola fastigiata)为景天科(Crassulaceae)红景天属(Rhodiola L.)多年生草本植物，在世界上主要分布于中国、尼泊尔、锡金、不丹及克什米尔地区，在我国主要分布于西藏、云南和四川。长鞭红景天是国家第二批确定的二级保护植物，同时由于对该植物资源的过度开发和对其生长环境的破坏，目前已列入了物种红色名录，处于近危状态。

红景天生长的海拔高，所处的环境恶劣，生长缓慢，种子萌发率很低。随着红景天的药物、保健食品、化妆品等的开发热潮，通过组织培养来进行快速繁殖红景天是一种有效的解决资源短缺、实现资源的可持续性发展利用的方法。长鞭红景天的快繁主要包括芽的诱导、生根等步骤。长鞭红景天诱导的芽生根比较容易，因此芽诱导步骤成为长鞭红景天组织快繁的关键步骤。

胡挺松等人在《植物生理学通讯》，2004，40(3)：335-335的“长鞭红景天的组织培养和快速繁殖”一文中介绍了以幼叶和嫩茎作为外植体，以WPM基本培养基添加激素6-苄基腺嘌呤(BAP)和吲哚-3-丁酸(IBA)，培养温度为(25±2)℃，光照时间每天10小时，实现了长鞭红景天的芽诱导。晏婴才等人在《植物生理学通讯》，2005，41(3)：341-341的“云南野生红景天的组织培养与快速繁殖”一文中介绍了以叶柄、茎尖为外植体，以MS基本培养基添加激素BAP和吲哚-3-乙酸(IAA)，以花芽为外植体，以MS基本培养基添加激素KT，以幼茎为外植体，以MS基本培养基添加激素激动素(KT)和IAA，变温(11～22℃)培养，光照时间每天12小时，实现了长鞭红景天的丛生芽诱导。HAI-JUN LIU等人(Hai-Jun Liu，Yan Xu，Yu-Jun Liu，Chun-Zhao Liu.Plant regeneration from leaf explants of Rhodiola fastigiata.In Vitro Cellular and Developmental Biology-Plant，2006，42(4)：345-347)的技术方案是以叶片为外植体，以MS基本培养基添加激素BAP和萘乙酸(NAA)，光照时间每天12小时，实现了长鞭红景天的芽诱导。

目前长鞭红景天的芽诱导效率还比较低，没有实现长鞭红景天的工厂化大规模生产。为了实现长鞭红景天的工厂化大规模生产，需要改进现有的培养基和培养方法，提高快繁过程中的芽诱导的效率，减低成本。长鞭红景天的芽诱导培养基是基本培养基加上细胞分裂素和生长素。我们在实验中发现，在芽诱导培养基中添加合适浓度的二甲基亚砜(DMSO)，按照合适的芽诱导方法，可以大大提高长鞭红景天芽诱导的效率。DMSO是一种既溶于水又溶于有机溶剂的非质子极性溶剂。作为一种渗透性保护剂，DMSO在动植物细胞的低温保存中广泛应用。DMSO在诱导动物和人的细胞分化方面也有报道。在植物的快繁中，特别是芽诱导过程中，没有应用DMSO来促进芽诱导的相关报道。

发明内容

本发明的目的在于解决传统长鞭红景天芽诱导中的出芽效率低等问题，提供添加二甲基亚砜(DMSO)的长鞭红景天芽诱导培养基。

本发明的再一目的是提供一种添加二甲基亚砜(DMSO)的长鞭红景天芽诱导培养基的制备方法。

本发明的还一目的是提供添加二甲基亚砜(DMSO)的长鞭红景天芽诱导培养基的用途，利用本发明提供的添加二甲基亚砜(DMSO)的长鞭红景天芽诱导培养基进行芽诱导的生长，在不影响诱导出芽的质量前提下，提高芽诱导的出芽数和出芽率，降低成本，为工厂化大规模生产打下坚实的基础。

本发明的添加二甲基亚砜(DMSO)的长鞭红景天芽导培养诱基是在每升MS基本培养基中含有细胞分裂素6-苄基腺嘌呤(BAP)的浓度为1μMol·L^-1～20μMol·L^-1(1μM～20μM)，生长素萘乙酸(NAA)的浓度为0.1μMol·L^-1～5μMol·L^-1(0.1μM～5μM)，二甲基亚砜(DMSO)的浓度为0.001ml·L^-1～20ml·L^-1。