[发明专利]一种HIV-1融合抑制剂体外筛选方法无效
| 申请号： | 200910079517.3 | 申请日： | 2009-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN101498722A | 公开（公告）日： | 2009-08-05 |
| 发明（设计）人： | 王存新;刘斌;何红秋;张小轶;谭建军;陈慰祖 | 申请（专利权）人： | 北京工业大学 |
| 主分类号： | G01N33/566 | 分类号： | G01N33/566;G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京思海天达知识产权代理有限公司 | 代理人： | 张燕慧 |
| 地址： | 100124*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 hiv 融合 抑制剂 体外 筛选 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种HIV-1融合抑制剂体外筛选方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)HIV-1gp41五螺旋蛋白的包被
将可吸附组氨酸标签的磁珠与带有组氨酸标签的HIV-1gp41五螺旋蛋白 粗提物于微孔板上在20-40℃下孵育10-20分钟，于磁板上沉淀后甩去孔中液 体，洗板后待用；
(2)待测化合物样品的制备
室温下将待测化合物样品用二甲亚砜配制成不同浓度的溶液，充分振荡 溶解后备用；
(3)待测化合物样品的筛选
微孔板设阴性对照3孔，每孔分别加入2μl二甲亚砜，设阳性对照3孔， 包被时不加五螺旋蛋白粗提物，其他孔中每孔分别加入2μl不同浓度的待测化 合物样品，之后所有孔均分别加入98μl报告基团标记C-螺旋溶液，振荡器充 分混匀后，在15-40℃下孵育10分钟，甩去孔内液体，洗板后用荧光分析仪 检测报告基团信号，计算待测样品的抑制率。
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