[发明专利]检测帕金森病的蛋白标志物、试剂盒及其应用无效
申请号: | 200910079929.7 | 申请日: | 2009-03-13 |
公开(公告)号: | CN101666798A | 公开(公告)日: | 2010-03-10 |
发明(设计)人: | 李尧华;陈彪;王坚;于顺 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学宣武医院 |
主分类号: | G01N33/566 | 分类号: | G01N33/566;G01N33/68 |
代理公司: | 北京北新智诚知识产权代理有限公司 | 代理人: | 程凤儒 |
地址: | 100053*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 帕金森病 蛋白 标志 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一组检测帕金森病的蛋白标志物,其特征在于,所述的蛋白标志物由以羧基为配基的纳米磁珠捕获并展示在血清蛋白质组图谱中的5个不同分子量的蛋白质组成:A:2961Da、B:4309Da、C:5234Da、D:6121Da和E:8170Da。
2.一种检测权利要求1所述的蛋白标志物的试剂盒,其特征在于,由以下成分组成:
1)以羧基为配基的纳米磁珠;
2)裂解液:9M Urea,20g/L CHAPS,10g/L DTT,50mMTris-HCl,pH9.0;
3)缓冲液:50mM NaAC,pH4.0;
4)去离子水;
5)芥子酸;
6)0.5%v/v三氟乙酸;
7)50%乙腈;
8)蛋白质阅读仪;
9)质控血清。
3.权利要求2所述的试剂盒在检测帕金森病中的应用,其特征在于,包括以下步骤:
1)利用裂解液处理待测血清样本30min;
2)向以羧基为配基的纳米磁珠中加入处理后的血清样本,捕获血清蛋白;
3)洗脱以羧基为配基的纳米磁珠,并用蛋白质阅读仪检测洗脱液中的5个蛋白标志物;
4)质控血清检测结果为阴性且受试样品检测结果重复性变异系数小于10%时该次实验结果有效,受试样品中5个蛋白标志物符合A:2961Da≤3.89μJ;B:4309Da≤4.39μJ;C:5234Da≤3.49μJ;D:6121Da≤1.53μJ;E:8170Da>15.06μJ为阴性,有一项或多项蛋白不符合则为阳性。
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