[发明专利]蓖麻碱的分离制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物碱的分离制备方法，特别涉及蓖麻碱的分离制备方法。

背景技术

蓖麻碱是蓖麻中的一种生物碱。蓖麻(Ricinus cammunis L)为大戟科(Euphorbiaceae)蓖麻属植物，是世界十大油料作物之一，在全世界广为种植，主要产区是印度、中国、巴西等国，产量占全世界蓖麻总产量的90％以上。在我国，蓖麻的主产地主要在内蒙古、吉林、山东和山西。蓖麻籽中含有50％左右的蓖麻籽油，榨油后的蓖麻粕含有35％左右的蛋白质。蓖麻粕中含有蓖麻碱、蓖麻毒蛋白、血细胞凝集素、变应原类毒素等，其中的蓖麻碱、蓖麻毒蛋白等都具有一定的生物活性，拥有广泛的开发应用前景。蓖麻碱作为蓖麻中的毒性成分之一，其生物活性主要有改善记忆、保肝护肝等，此外还可以作为杀虫剂和杀线虫剂，用作生物农药。

目前蓖麻碱主要通过有机溶剂提取，通过结晶获得纯度较高的蓖麻碱纯品。蓖麻碱在蓖麻粕中含量约0.3％-0.4％，在蓖麻籽壳中的含量约1.5％。传统方法制备蓖麻碱得到的蓖麻碱纯度不高，结晶过程麻烦，制备量小，且损失大。

发明内容

本发明的目的在于提供蓖麻碱的分离制备方法，利用该方法得到的蓖麻碱的纯度高达98％。

本发明提供的蓖麻碱的分离制备方法包括以下步骤：

1)将蓖麻的蓖麻粕用抽提液抽提，得到蓖麻碱粗提物；

2)选择两相溶剂体系，采用高速逆流色谱法，将步骤1)得到的蓖麻碱粗提物进行分离纯化，得到蓖麻碱。

步骤2)中的两相溶剂体系是体积比均为(2-5)∶(1-4)∶(1-2)的二氯甲烷/甲醇/水或1，2-二氯乙烷/甲醇/水或三氯甲烷/甲醇/水，优选为5∶4∶2或2∶2∶1或2∶1∶1的三氯甲烷/甲醇/水。

两相中的上相为固定相，下相为流动相。

步骤2)中，高速逆流色谱法所用的的分离柱转速为500rpm-1000rpm，优选为600rpm-800rpm。

所述流动相在所述分离柱中的流速为0.5-8ml/min，优选为3-6ml/min。

所述两相溶剂体系在所述分离柱中的温度为20-30℃。

所述高速逆流色谱仪所用的样品，是蓖麻碱粗提物溶于溶样溶剂中形成的溶液；所述溶样溶剂是由5ml上相和5ml下相组成的溶剂。

所述分离纯化用的检测波长为310nm。

上述步骤1)重复2-4次，所述蓖麻粕可商业化购买或将蓖麻籽用脱脂溶剂脱脂得到的；所述蓖麻籽为蓖麻籽仁和/或蓖麻籽壳。

将蓖麻籽用脱脂溶剂脱脂的方法包括如下步骤：将蓖麻籽和脱脂溶剂混合，磁力搅拌，然后抽滤，风干。

所述脱脂溶剂的体积与蓖麻籽的质量的比例为4-10毫升∶1克，优选5-8毫升∶1克；所述脱脂溶剂选自以下至少一种物质：石油醚、乙醚和乙酸乙酯；所述脱脂溶剂优选为石油醚和乙醚，石油醚和乙醚的体积比为2∶1；所述磁力搅拌时间为0.5-3小时，优选1-2小时。

上述步骤1)中的抽提的方法包括以下步骤：将蓖麻粕与抽提液混合，经索式抽提得到提取液，将提取液浓缩；所述索式抽提的时间为2-5小时；所述浓缩在35℃-45℃的真空条件下浓缩至10-30ml，优选15-20ml。

所述抽提液的体积与所述蓖麻粕的质量的比例为6-12毫升∶1克，优选8-10毫升∶1克；所述抽提液为醇溶液或水或三氯甲烷；所述醇溶液是浓度为85％-95％(体积百分比)的甲醇溶液或乙醇溶液；所述水的温度为70-100℃。

按照本发明提供的方法制备出的蓖麻碱的纯度达到98％以上。

本发明采用高效逆流色谱(High-speed Counter-current Chromatography，HSCCC)进行蓖麻碱的分离纯化，与以往的技术手段相比具有明显的优点：进样量大、分离能力强、分离时间短、样品损失小，以及分离和纯化可同步完成。本发明提供的方法适于各种型号的高速逆流色谱仪。

附图说明

图1为转速为800转/分钟的HSCCC谱图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不限于以下实施例。

下述实施例中，如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中，所述百分含量如无特殊说明，均为质量百分含量。

实施例1.

称取蓖麻籽仁100g，加入500ml体积比为2∶1的石油醚和乙醚溶液，室温磁力搅拌提取1h，抽滤，得到蓖麻粕。重复以上步骤2次，将蓖麻粕(滤饼)风干。