[发明专利]HPV16型L2N120E7E6融合蛋白、基因、制备方法及用途有效
| 申请号： | 200910084404.2 | 申请日： | 2009-05-13 |
| 公开（公告）号： | CN101885778A | 公开（公告）日： | 2010-11-17 |
| 发明（设计）人： | 田厚文;赵莉;毛子安;庄昉成;任皎;高见;冯靖;庞正;姜云水;阮力 | 申请（专利权）人： | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;A61K39/12;A61P31/20;A61P35/00;A61P15/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 | 代理人： | 刘丹妮 |
| 地址： | 100052 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | hpv16 l2n120e7e6 融合 蛋白 基因 制备 方法 用途 | ||
1.一种人乳头瘤病毒(HPV)16型L2N120E7E6融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列为SQE ID NO.2所示的序列。
2.一种用于编码权利要求1所述的人乳头瘤病毒(HPV)16型L2N120E7E6融合蛋白的DNA序列，其特征在于，所述DNA序列的核苷酸序列为SQE ID NO.1所示的序列。
3.一种大肠杆菌表达质粒载体，其特征在于，所述的质粒载体是由权利要求2所述的HPV16型L2N120E7E6基因片段插入至质粒pET9a的Nde I和BamH I位点之间来构建的。
4.根据权利要求3所述的大肠杆菌表达质粒载体，其特征在于，所述的大肠杆菌是BL21(DE3)。
5.一种用于生产权利要求1所述的人乳头瘤病毒(HPV)16型L2N120E7E6融合蛋白的大肠杆菌菌株，其特征在于，所述大肠杆菌菌株含有权利要求3所述的质粒载体。
6.根据权利要求5所述的大肠杆菌菌株，其特征在于，所述的大肠杆菌为BL21(DE3)。
7.一种制备权利要求1所述的人乳头瘤病毒(HPV)16型L2N120E7E6融合蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
1)将权利要求2所述的HPV16L2N120E7E6基因片段插入大肠杆菌表达载体pET9a的NdeI和BamHI位点，将该质粒转化大肠杆菌获得含有pET9a16L2N120E7E6的菌株，接种培养，IPTG诱导表达；
2)表达菌体经离心裂解后，收获包涵体，用8M尿素悬起，离心，取上清用CM柱纯化表达蛋白。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述的大肠杆菌是BL21(DE3)。
9.一种制备用于预防和/或治疗人乳头瘤病毒16型感染及其相关疾病(如宫颈癌)药物的方法，其特征在于，所述方法包括，将权利要求5或6所述的大肠杆菌菌株用于发酵生产L2N120E7E6融合蛋白。
10.权利要求1所述的人乳头瘤病毒(HPV)16型L2N120E7E6融合蛋白、权利要求2所述的人乳头瘤病毒(HPV)16型L2N120E7E6融合蛋白的DNA序列、权利要求3-4任一项所述的大肠杆菌表达质粒载体或权利要求5-6任一项所述的大肠杆菌菌株在制备用于预防和/或治疗人乳头瘤病毒16型感染及其相关疾病(如宫颈癌)的药物中的应用；优选地，所述药物为疫苗；最优选地，所述疫苗同时具有为预防和治疗作用。
11.一种用于预防和/或治疗宫颈癌的疫苗，其特征在于，所述疫苗包括权利要求1所述的人乳头瘤病毒(HPV)16型L2N120E7E6融合蛋白。
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