[发明专利]一种植物基因组快速提取试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种植物基因组快速提取试剂盒，包括：

裂解液：0.3-1.0mol/L NaOH，5-20mmol/L EDTA，10-30mmol/LTris-HCl，30-60mmol/L KCl，0.03-0.08％Tween20，0.05-0.15％TritonX-100，0.05-0.20％PVP，0.05-0.15％牛血清白蛋白，0.05-0.15％DEPC；

中和液：2-5mol/L NaAc，20-70mmol/L NaCl，20-40mmol/LMgCl₂，20-40mmol/L MnCl₂，pH＝5.2；

沉淀液：0.05-0.20mol/L NaAc和0.05-0.20mol/L NH₄Ac的异丙醇溶液。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述裂解液的配置为：0.5mol/L NaOH，10mmol/L EDTA，25mmol/L Tris-HCl，50mmol/L KCl，0.05％Tween20，0.1％TritonX-100，0.1％PVP，0.1％牛血清白蛋白，0.1％DEPC。

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述中和液的配置为：3mol/L NaAc，50mmol/L NaCl，25mmol/L MgCl₂，25mmol/LMnCl₂，pH＝5.2。

4.如权利要求1～3任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述沉淀液的配置为：0.1mol/L NaAc和0.1mol/L NH₄Ac的异丙醇溶液。

5.权利要求1～4任一项所述试剂盒在提取植物基因组中的应用。

6.一种提取植物基因组的方法，其包括如下步骤：

1)取研磨成粉末状的植物组织样品，按重量体积比1∶5～20加入权利要求1～4任一项所述试剂盒中裂解液；

2)轻微搅动混匀后，沸水浴50～70S；

3)加入权利要求1～4任一项所述试剂盒中的中和液调节pH至5.2～6.0，轻轻颠倒混匀；

4)离心取上清，加入上清液等体积预冷的权利要求1～4任一项所述沉淀液，混匀后离心弃上清；

5)用适量乙醇溶液洗涤沉淀并吹干。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，其中步骤1)按照样品与裂解液重量体积比1∶10加入裂解液。

8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，其中步骤2)沸水浴1min。

9.如权利要求6～8任一项所述的方法，其特征在于，其中步骤3)按照中和液与裂解液体积比2∶3加入中和液中和。

10.如权利要求6～8任一项所述的方法，其特征在于，其中步骤4)离心转速为12000rpm，离心10～12min。