[发明专利]一种快速分离分析扎鲁司特及其同分异构体的HPLC方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高效液相色谱分析方法，尤其是一种扎鲁司特及其同分异构体的分离与分析测定。

背景技术

扎鲁司特(Zafirlukast)是一种白三烯受体拮抗剂，竞争性抑制白三烯活性，适用于哮喘的预防和长期治疗。在化学合成过程中，最后一步中间体[中间体-6，化学名称：4-(5-环戊酰基氨基-1-甲基吲哚-3-基甲基)-3-甲氧基苯甲酸]与邻甲苯磺酰胺发生缩合反应即可生成扎鲁司特，由于其中的反应原料邻甲苯磺酰胺本身纯度不可能达到100％，往往同时含有杂质(两个同分异构体)：间甲苯磺酰胺、对甲苯磺酰胺。因此在最后一步反应中，中间体-6会与邻甲苯磺酰胺中的杂质间甲苯磺酰胺、对甲苯磺酰胺发生副反应生成扎鲁司特同分异构体m-扎鲁司特、p-扎鲁司特，导致终产品中可能残留有此两种副产物，会影响产品的质量，其终产品及主要有关物质的化学结构如下：

扎鲁司特 [3-[2-甲氧基-4-[(2-甲苯基)磺酰胺基甲酰基]苄基]-1-甲基-吲哚-5-基]氨基甲酸环戊酯

m-扎鲁司特 [3-[2-甲氧基-4-[(3-甲苯基)磺酰胺基甲酰基]苄基]-1-甲基-吲哚-5-基]氨基甲酸环戊酯

p-扎鲁司特 [3-[2-甲氧基-4-[(4-甲苯基)磺酰胺基甲酰基]苄基]-1-甲基-吲哚-5-基]氨基甲酸环戊酯

中间体-6 4-(5-环戊酰基氨基-1-甲基吲哚-3-基甲基)-3-甲氧基苯甲酸

邻甲苯磺酰胺 甲苯-2-磺酰胺

从以上各化学成分的结构来看，结构均类似；特别是扎鲁司特与其同分异构体m-扎鲁司特、p-扎鲁司特结构非常相似，因此采用HPLC法时，在同一色谱柱上进行以上各组分的有效分离是相当困难的，事实上也是如此，通过改变二元或三元流动相比例、pH值、离子强度等方法结果均不是很理想。

关于扎鲁司特采用HPLC法进行有关物质测定的方法有所报道，即“RP-HPLC法测定扎鲁司特及其有关物质的含量，杨伟峰、李会林，药物分析杂志2008，28(7)”，该报道进行扎鲁司特及合成中间体的分离，未考虑到合成中的副反应产物，故未发现扎鲁司中特异性杂质m-扎鲁司特、p-扎鲁司特；且采用该条件不能分离出扎鲁司特同分异构体，未能有效控制扎鲁司特的质量。而文献“Identification，characterization and synthesis of impurities of zafirlukast，G.Goverdhan，et al.，J.Pharm.Biomed.Anal.(2009)，doi：10.1016”中采用梯度洗脱的方法进行了扎鲁司特及其同分异构体分离，但该方法复杂且分析时间太长(约100多分钟，其中包括梯度洗脱时间85分钟)，只适合在实验室中作为研究手段，而无法应用于日常生产中产品质量控制及放行。到目前为止，尚无文献报道对扎鲁司特及其同分异构体成功进行快速等度洗脱分离分析的方法，而本领域亟需这样的技术应用于扎鲁司特的质量控制。

发明内容

现在，我们意外发现，采用C₁₈、C₈或苯基柱，缓冲液(pH2～7)与另外一种或两种有机溶剂以一定配比组成二元或三元流动相进行等度洗脱，流动相的流速为0.6ml/min～2.0ml/min。用该方法可以简便、快速、有效的分离分析扎鲁司特及其同分异构体，能满足能日常生产中产品质量控制及放行要求，能有效控制扎鲁司特的质量(见图1)，从而解决了一直困扰本领域技术人员的上述问题，完成了本发明。

本发明的目的在于提供一种简单快速分离分析扎鲁司特及其同分异构体的高效液相色谱方法，从而实现扎鲁司特及其同分异构体的分离分析测定，有效控制扎鲁司特原料药及其制剂的质量。

本发明所说的用HPLC法分离分析扎鲁司特及其同分异构体的方法，是以C₁₈、C₈或苯基柱，流动相水相pH值为2～7，其中水相与另外一种或两种有机溶剂以一定配比组成二元或三元流动相系统进行等度洗脱，流速为0.6ml/min～2.0ml/min。用该方法可以简单、快速、有效的分离分析扎鲁司特及其同分异构体。