[发明专利]一种黄芪糖蛋白及其制备方法和用途有效
申请号: | 200910089580.5 | 申请日: | 2009-07-23 |
公开(公告)号: | CN101962402A | 公开(公告)日: | 2011-02-02 |
发明(设计)人: | 冯前进;薛慧清;杨向竹;牛欣;刘亚明;赵俊云;宋强;王永辉;张立伟 | 申请(专利权)人: | 山西中医学院 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;A61K38/16;A61P37/06 |
代理公司: | 北京太兆天元知识产权代理有限责任公司 11108 | 代理人: | 张韬 |
地址: | 030024 *** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 黄芪 糖蛋白 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种黄芪糖蛋白(HQGP),其特征在于该糖蛋白的分子量为50-55kD。
2.如权利要求1所述的黄芪糖蛋白,其特征在于该糖蛋白的分子量为53.26kD。
3.如权利要求1或2所述的黄芪糖蛋白,其特征在于该糖蛋白呈乳白色粉状,易溶于水,不溶于有机溶剂甲醇、乙醇、乙醚、丙酮和氯仿;浓度为0.096mg/ml的黄芪糖蛋白水溶液于23℃下测定pH值为5.8;浓度为0.08g/100ml的黄芪糖蛋白水溶液的比旋光度为-56.38°。
4.如权利要求1或2所述的黄芪糖蛋白,其特征在于将该黄芪糖蛋白配置成浓度为0.5mg/ml的水溶液,以水为空白,在200nm-320nm波长范围内扫描得紫外光谱图,显示特征吸收峰为485nm和280nm。
5.如权利要求1或2所述的黄芪糖蛋白,其特征在于该黄芪糖蛋白配置成浓度为0.5mg/ml的水溶液,采用KBr压片法,在4000cm-1-500cm-1范围内扫描,得红外图谱,吸收峰位于3500cm-1-2800cm-1之间,3399.2,2962.6,1643.2,1546.2,1403.0,1246.5cm-1处有明显吸收峰;其中3399.2cm-1为多糖羟基伸缩振动吸收峰,2962.6cm-1糖C-H伸缩振动吸收峰,1403cm-1为多糖C-O振动吸收峰,1246.5cm-1为吡喃糖环醚键C-O-C的吸收峰,1643.2cm-1和1546.2cm-1处为酰胺基的N-H振动吸收峰。
6.如权利要求1或2所述的黄芪糖蛋白,其特征在于该糖蛋白的糖肽的结合方式为N-糖肽键。
7.如权利要求1或2所述的黄芪糖蛋白,其特征在于该糖蛋白中氨基酸组成及含量为:每100g糖蛋白含氨基酸总量57.18g,其中天门冬氨酸4.50g,苏氨酸3.20g,丝氨酸2.33g,谷氨酸6.49g,甘氨酸3.83g,丙氨酸1.68g,胱氨酸1.42g,缬氨酸5.99g,蛋氨酸0.92g,异亮氨酸2.31g,亮氨酸2.34g,酪氨酸4.39g,苯丙氨酸1.93g,赖氨酸6.50g,组氨酸2.00g,精氨酸1.44g,脯氨酸5.91g。
8.如权利要求1至7任一所述的黄芪糖蛋白,其特征在于该糖蛋白由如下方法制备而成:
取黄芪药材,将其粉碎成粉末状,称取200-600重量份,加水1200-2000体积份,浸泡8-16小时,40-60℃以下浸提1-3小时,过滤;残渣中再加水800-1600体积份,40-60℃以下浸提1-3小时,过滤,合并两次滤液,以2000-4000r/min速度离心20-40分钟,合并上清液,得粗提液;
将粗提液浓缩至200-400体积份,加入研磨成粉状的硫酸铵,边加边搅拌至饱和,于2-6℃下静置12-24小时,以2000-4000r/min速度离心20-40分钟,弃去上清液,得沉淀;
沉淀加入少量水溶解,再加入硫酸铵至饱和,静置1-3小时,以2000-4000r/min速度离心20-40分钟,弃去上清液,沉淀再用少量水溶解,重复上述步骤,得到沉淀,为粗糖蛋白;
把粗糖蛋白加少量水溶解,加入sevag试剂,剧烈振摇10-30分钟,离心,倾出上清液,除去中间层黄色胶状变性蛋白和下层氯仿,重复该步骤至中间层几乎无变性蛋白;
将上清液置于透析袋中,纯水透析24-72小时,得黄芪糖蛋白溶液,经冷冻干燥,得乳白色粉状物黄芪糖蛋白。
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