[发明专利]一种黄芪糖蛋白及其制备方法和用途

说明书

发明领域

本发明涉及一种黄芪提取物，特别涉及一种黄芪糖蛋白及其制备方法和用途。

背景技术

糖蛋白(glycoprotein)是一类由糖类与多肽或蛋白质以共价键连接而形成的结合蛋白，广泛地存在于自然界动物植物和某些微生物中，是生物体内重要的一类大分子。20世纪60年代，生物化学家和化学家们对长期忽视的糖蛋白产生了兴趣，开展了多方面的研究。越来越多的研究发现，糖蛋白具有显著的药用功效和保健功能，能够增强免疫调节、抑制肿瘤、降低血糖、血脂、抗氧化、防衰老等，对于人体极具利用价值。目前已应用于临床并具有高效的免疫活性的药用蛋白制剂大都是糖蛋白。近年来，植物和天然产物来源的糖蛋白，在生物化学、生物工程学、临床化学、药学及食品等领域受到高度重视。特别是存在于植物中的糖蛋白，在新型特种药物及功能性食品开发方面具有广阔的运用前景。

山西道地药材黄芪是一种常用补气固表中药材，能够增强机体的免疫功能。自20世纪70年代以来，国内外学者对黄芪化学成分及药理作用进行了大量的研究，从中提取分离许多黄酮类、皂苷类、多糖等化合物，并对其药理作用及生物活性进行了研究。但迄今为止，尚未见到有关黄芪糖蛋白的研究报道。

发明内容

本发明目的在于公开一种黄芪糖蛋白，本发明的目的还在于公开该糖蛋白的制备方法，本发明的目的还在于公开该糖蛋白的用途。

本发明目的是通过如下技术方案实现的：

本发明黄芪糖蛋白由如下方法制备：

取黄芪药材，将其粉碎成粉末状，称取200-600重量份，加水1200-2000体积份，浸泡8-16小时，40-60℃以下浸提1-3小时，过滤；残渣中再加水800-1600体积份，40-60℃以下浸提1-3小时，过滤，合并两次滤液，以2000-4000r/min速度离心20-40分钟，合并上清液，得粗提液；

将粗提液浓缩至200-400体积份，加入研磨成粉状的硫酸铵，边加边搅拌至饱和，于2-6℃下静置12-24小时，以2000-4000r/min速度离心20-40分钟，弃去上清液，得沉淀；

沉淀加入少量水溶解，再加入硫酸铵至饱和，静置1-3小时，以2000-4000r/min速度离心20-40分钟，弃去上清液，沉淀再用少量水溶解，重复上述步骤，得到沉淀，为粗糖蛋白；

把粗糖蛋白加少量水溶解，加入sevag试剂，剧烈振摇10-30分钟，离心，倾出上清液，除去中间层变性蛋白和下层氯仿，重复该步骤至中间层几乎无变性蛋白；

将上清液置于透析袋中，纯水透析24-72小时，得黄芪糖蛋白溶液，经冷冻干燥，得乳白色粉状物黄芪糖蛋白(HQGP)。

本发明黄芪糖蛋白优选如下方法制备：

取黄芪药材，将其粉碎成粉末状，称取400重量份，加水1600体积份，浸泡12小时，55-60℃以下浸提2小时，过滤；残渣中再加水1200体积份，55-60℃以下浸提2小时，过滤，合并两次滤液，以3000r/min速度离心30分钟，合并上清液，得粗提液；

将粗提液浓缩至300体积份，加入研磨成粉状的硫酸铵，边加边搅拌至饱和，于4℃下静置12小时，以3000r/min速度离心30分钟，弃去上清液，得沉淀；

沉淀加入少量水溶解，再加入硫酸铵至饱和，静置2小时，以3000r/min速度离心30分钟，弃去上清液，沉淀再用少量水溶解，重复上述步骤，得到沉淀，为粗糖蛋白；

把粗糖蛋白加少量水溶解，加入sevag试剂，剧烈振摇20分钟，离心，倾出上清液，除去中间层黄色胶状变性蛋白和下层氯仿，重复该步骤至中间层几乎无变性蛋白；

将上清液置于透析袋中，在空气恒温振荡器上用纯水透析48小时，得黄芪糖蛋白溶液，经冷冻干燥，得乳白色粉状物黄芪糖蛋白(HQGP)。

本发明黄芪糖蛋白优选如下方法制备：

取黄芪药材，将其粉碎成粉末状，称取300重量份，加水1900体积份，浸泡9小时，50℃以下浸提3小时，过滤；残渣中再加水1500体积份，50℃以下浸提1小时，过滤，合并两次滤液，以3500r/min速度离心35分钟，合并上清液，得粗提液；

将粗提液浓缩至250体积份，加入研磨成粉状的硫酸铵，边加边搅拌至饱和，于3℃下静置24小时，以3500r/min速度离心35分钟，弃去上清液，得沉淀；

沉淀加入少量水溶解，再加入硫酸铵至饱和，静置1小时，以2500r/min速度离心35分钟，弃去上清液，沉淀再用少量水溶解，重复上述步骤，得到沉淀，为粗糖蛋白；