[发明专利]一种检测犬细小病毒的LAMP试剂盒有效
申请号: | 200910090012.7 | 申请日: | 2009-07-24 |
公开(公告)号: | CN101624635A | 公开(公告)日: | 2010-01-13 |
发明(设计)人: | 李刚;张坤;范晓娟 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 | 代理人: | 杨 静 |
地址: | 100193*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 细小 病毒 lamp 试剂盒 | ||
1.一种用于检测犬细小病毒的特异性LAMP引物组,包括以下引物:
F3: 5’-TGCATCATTGATGGTTGC-3’;
B3: 5’-TGGCACAGAATTTTCGATAG-3’;
FIP: 5’-GGTATGGTTGGTTTCCATGGATA
AATATGCCATTTACTCCAGCAG-3’;
BIP: 5’-CCATCTCATACTGGAACTAGTG
GCGCATCATCTGGATCTGTACC-3’;
LF: 5’-CCCAATGTCTCAGATCTCAT-3’;
LB: 5’-CACCAGCAGATATATACCAT-3’。
2.一种包括权利要求1所述的引物组的检测犬细小病毒的LAMP检测试剂盒。
3.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,还包含LAMP反应液,与LAMP引物共同构成LAMP检测体系;25μL LAMP检测体系的具体配置为:
F3、B3 各0.08μM~0.12μM;
FIP、BIP 各0.64μM~0.96μM;
LF、LB 各0.32μM~0.48μM;
dNTP 0.6mM~1.2mM;
Mg2+ 4mM~10mM;
反应缓冲液10×ThermoPol Reaction Buffer 1×;
链置换DNA聚合酶Bst DNA polymerase 8U;
甜菜碱betaine 0.2mM~1.0mM。
4.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述25μL LAMP检测体系的具体配置为:
F3、B3 各0.1μM;
FIP、BIP 各0.8μM;
LF、LB 各0.4μM;
dNTP 1.0mM;
Mg2+ 8mM;
反应缓冲液10×ThermoPol Reaction Buffer 1×;
链置换DNA聚合酶Bst DNA polymerase 8U;
甜菜碱betaine 0.3mM。
5.如权利要求2-4任一所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒的检测反应条件为:65℃恒温1h,80℃ 2min,然后终止反应。
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