[发明专利]一种检测犬细小病毒的LAMP试剂盒有效

专利信息
申请号: 200910090012.7 申请日: 2009-07-24
公开(公告)号: CN101624635A 公开(公告)日: 2010-01-13
发明(设计)人: 李刚;张坤;范晓娟 申请(专利权)人: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 代理人: 杨 静
地址: 100193*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 检测 细小 病毒 lamp 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种用于检测犬细小病毒的特异性LAMP引物组,包括以下引物:

F3:  5’-TGCATCATTGATGGTTGC-3’;

B3:  5’-TGGCACAGAATTTTCGATAG-3’;

FIP: 5’-GGTATGGTTGGTTTCCATGGATA

      AATATGCCATTTACTCCAGCAG-3’;

BIP: 5’-CCATCTCATACTGGAACTAGTG

      GCGCATCATCTGGATCTGTACC-3’;

LF:  5’-CCCAATGTCTCAGATCTCAT-3’;

LB:  5’-CACCAGCAGATATATACCAT-3’。

2.一种包括权利要求1所述的引物组的检测犬细小病毒的LAMP检测试剂盒。

3.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,还包含LAMP反应液,与LAMP引物共同构成LAMP检测体系;25μL LAMP检测体系的具体配置为:

F3、B3                                     各0.08μM~0.12μM;

FIP、BIP                                   各0.64μM~0.96μM;

LF、LB                                     各0.32μM~0.48μM;

dNTP                                       0.6mM~1.2mM;

Mg2+                                       4mM~10mM;

反应缓冲液10×ThermoPol Reaction Buffer    1×;

链置换DNA聚合酶Bst DNA polymerase          8U;

甜菜碱betaine                              0.2mM~1.0mM。

4.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述25μL LAMP检测体系的具体配置为:

F3、B3                                     各0.1μM; 

FIP、BIP                                   各0.8μM;

LF、LB                                     各0.4μM;

dNTP                                       1.0mM;

Mg2+                                       8mM;

反应缓冲液10×ThermoPol Reaction Buffer    1×;

链置换DNA聚合酶Bst DNA polymerase          8U;

甜菜碱betaine                              0.3mM。

5.如权利要求2-4任一所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒的检测反应条件为:65℃恒温1h,80℃ 2min,然后终止反应。 

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