[发明专利]一种融合肝素酶及其编码基因有效
申请号: | 200910090169.X | 申请日: | 2009-07-29 |
公开(公告)号: | CN101608180A | 公开(公告)日: | 2009-12-23 |
发明(设计)人: | 邢新会;叶逢春;张翀;蒋培霞 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
主分类号: | C12N9/96 | 分类号: | C12N9/96;C12N15/62;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/00;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关 畅;任凤华 |
地址: | 10008*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 融合 肝素 及其 编码 基因 | ||
1.一种蛋白,是由序列表中序列1的第8-1016所示的氨基酸序列组成的蛋白质。
2.权利要求1所述蛋白的编码基因。
3.根据权利要求2所述的基因,其特征在于:所述基因的核苷酸序列是序列表中序列2所示的核苷酸序列。
4.含有权利要求2或3所述基因的转基因细胞系。
5.含有权利要求2或3所述基因的重组载体。
6.根据权利要求5所述的重组载体,其特征在于:所述重组载体是通过以下步骤构建的:
将序列表中序列2的第1位-1881位所示的DNA片段插入质粒pMAL-c2x-HepA的多克隆位点,得到重组载体;
所述质粒pMAL-c2x-HepA是将序列2的第1959-3048位所示的肝素酶I的编码基因插入到质粒pMAL-c2x的BamHI和HindIII酶切位点之间,得到的重组质粒。
7.含有权利要求2或3所述基因的重组菌。
8.根据权利要求7所述的重组菌,其特征在于:所述重组菌是含有权利要求5或6所述的重组载体的重组大肠杆菌。
9.一种生产肝素酶的方法,是将权利要求7或8所述的重组菌诱导培养,表达得到肝素酶。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:所述诱导培养条件是:0.3-1mM的IPTG,10-30℃诱导培养5-30小时。
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