[发明专利]一种甲烷氧化混合菌的保存方法

权利要求书

1.一种甲烷氧化混合菌的保存方法，包括如下步骤：将甲烷氧化混合菌加入NMS培养基中，于密封瓶中2-6℃保存；初始时，所述密封瓶中，NMS培养基、甲烷和空气的体积比为(5-30)∶(5-40)∶(30-80)；

所述甲烷氧化混合菌为处于对数生长期的甲烷氧化混合菌；

所述NMS培养基配制方法如下：将100ml溶液A和1ml溶液B混合并用水定容至1L，灭菌后加入10ml灭菌后的溶液C，得到NMS培养基；每升所述溶液A的配制方法为：将KNO₃ 10g，MgSO₄·7H₂O 10g，CaCl₂·2H₂O 2g，水定容至1L；每升所述溶液B的配制方法为：Fe-EDTA 0.38g，NaMoO₄ 0.26g，FeSO₄ 0.5g，MnCl₂·4H₂O 0.02g，CoCl₂·6H₂O0.05g，H₃BO₃ 0.015g，Na-EDTA 0.25g，ZnSO₄·7H₂O 0.4g，NiCl₂·6H₂O 0.01g，CuSO₄·5H₂O0.025g，水定容至1L；每升所述溶液C的配制方法为：Na₂HPO₄·12H₂O 71.6g，KH₂PO₄ 26g，水定容至1L，pH值调至6.8。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：初始时，所述密封瓶中，NMS培养基、甲烷和空气的体积比为5∶(2.5-3.5)∶(15-18)。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：初始时，所述NMS培养基中所述甲烷氧化混合菌的OD₆₆₀为0.3-1.5。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：每隔10-60天重新向密封瓶中充入甲烷，使所述密封瓶中，NMS培养基、甲烷和空气的体积比为(5-30)∶(5-40)∶(30-80)。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于：重新充入甲烷后，所述密封瓶中，NMS培养基、甲烷和空气的体积比为5∶(2.5-3.5)∶(15-18)。