[发明专利]葡萄糖-6-磷酸脱氢酶及其核苷酸序列、重组载体、重组宿主细胞和试剂盒有效
申请号: | 200910092373.5 | 申请日: | 2009-09-07 |
公开(公告)号: | CN101638640A | 公开(公告)日: | 2010-02-03 |
发明(设计)人: | (请求不公开姓名) | 申请(专利权)人: | 北京利德曼生化股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/04 | 分类号: | C12N9/04;C12N15/53;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19;C12N5/10;C12Q1/50;C12Q1/32;C12Q1/68;C12R1/19;C12R1/01 |
代理公司: | 北京银龙知识产权代理有限公司 | 代理人: | 钟 晶 |
地址: | 100176北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 葡萄糖 磷酸 脱氢酶 及其 核苷酸 序列 重组 载体 宿主 细胞 试剂盒 | ||
1.一种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶,其特征在于,所述葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。
2.一种编码葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的核苷酸序列,其特征在于,所述核苷酸序列为编码权利要求1所述的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的核苷酸序列,其中,所述核苷酸序列为
(1)SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列;或者
(2)对SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列进行一个或几个核苷酸取代而得到的密码子同义突变的核苷酸序列。
4.根据权利要求3所述的核苷酸序列,其中,所述核苷酸序列为
(1)SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列;或者
(2)SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列。
5.一种重组载体,其特征在于,所述重组载体由空载体和插入该空载体的目的基因组成,所述目的基因为权利要求2-4中任意一项所述的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的核苷酸序列。
6.根据权利要求5所述的重组载体,其特征在于,所述空载体为pET28b(+)。
7.一种重组宿主细胞,其特征在于,所述重组宿主细胞含有权利要求5或6所述的重组载体。
8.根据权利要求7所述的重组宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为大肠杆菌BL21(DE3)或大肠杆菌BL21-Rosetta。
9.一种检测肌酸激酶的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:
权利要求1所述的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶。
10.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括:溶于pH 6.5-7.0的80-120mM咪唑缓冲液中的15-25mM N-乙酰半胱氨酸、1-3mM乙二胺四乙酸、1-3mM的NADP、1-3KU/L的G6PDH、2-3KU/L的己糖激酶、1-3mM的ADP;以及溶于pH 9.0-11.0的40-60mM 3-(环己胺)-2-羟基-1-丙磺酸缓冲液中的15-30mM的葡萄糖和20-40mM的肌酸磷酸。
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