[发明专利]一种果胶酶及其编码基因有效
申请号: | 200910093925.4 | 申请日: | 2009-09-23 |
公开(公告)号: | CN102021157A | 公开(公告)日: | 2011-04-20 |
发明(设计)人: | 马延和;李刚;薛燕芬 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所 |
主分类号: | C12N9/26 | 分类号: | C12N9/26;C12N15/56;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/00;C12N1/21;C12N15/11;C12P19/14;C12R1/07;C12R1/19 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 100101 北京市朝阳区北辰*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 果胶酶 及其 编码 基因 | ||
1.一种蛋白质,是如下(a)或(b)的蛋白质:
(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有果胶酶活性的由序列1衍生的蛋白质。
2.编码权利要求1所述蛋白的基因。
3.根据权利要求2所述的基因,其特征在于:所述基因是如下1)或2)或3)或4)的DNA分子:
1)编码序列是序列表中序列2自5′端第109至1089位核苷酸所示的DNA分子;
2)编码序列是序列表中序列2所示的DNA分子;
3)在严格条件下与1)或2)限定的DNA序列杂交且编码所述蛋白的DNA分子;
4)与1)或2)或3)限定的DNA序列具有90%以上同源性,且编码具有果胶酶活性的蛋白的DNA分子。
4.含有权利要求2或3所述基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
5.如权利要求4所述的重组载体,其特征在于:所述重组载体为如下(I)或(II)的重组质粒:
(I)将权利要求2或3所述基因插入pUC18质粒的多克隆位点得到的重组质粒;
(II)将权利要求2或3所述基因插入pET28a质粒的多克隆位点得到的重组质粒。
6.如权利要求4所述的重组菌,其特征在于:所述重组菌是将权利要求5的(II)所述的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)得到的。
7.一种制备果胶酶的方法,是培养权利要求4或6所述的重组菌,得到果胶酶。
8.扩增权利要求2或3所述基因的全长及其任意片段的引物对。
9.权利要求1所述蛋白、权利要求2或3所述基因、权利要求4、5或6所述重组表达载体、所述表达盒、转基因细胞系或重组菌中的任意一种在降解多聚半乳糖醛酸中的应用。
10.如权利要求9所述的应用,其特征在于:应用权利要求1所述蛋白降解多聚半乳糖醛酸时,温度为40-70℃,pH为9-12。
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