[发明专利]一种蛹虫草菌种的培养方法

权利要求书

1.一种蛹虫草菌种的培养方法，其特征在于，其包括如下步骤：

1)多孢的获得

将蛹虫草无性阶段的分生孢子和/或蛹虫草有性阶段子实体形成的子囊孢子作为培养的蛹虫草多孢；

2)多孢的增殖培养

采用PDA液体培养基对多孢进行震荡培养，培养温度16-25℃，转速100-140rpm，避光培养120-240小时，得多孢菌丝球；

3)菌丝球的破碎

将多孢菌丝球在均质机中转速1000-20000rpm下粉碎处理5-20min；

4)静止液体培养

然后将粉碎后的菌种接入到静止液体培养基中，摇匀后静止培养20-45天；

5)优良菌种的获得

当液体培养基表面出现子实体时，通过组织分离的方式获得优良菌株。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中，所述蛹虫草无性阶段的分生孢子的获得：采用退化或新分离获得的蛹虫草斜面或平板，光照培养，使斜面或平板菌落形成大量分生孢子。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中，所述蛹虫草有性阶段子实体形成子囊孢子的过程：在无菌下，将成熟的子实体中子囊果丰富的部分切割，然后在室温的条件下放置10-15天，收集弹射出的成熟的子囊孢子。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的方法，其特征在于，步骤4)中所述静止液体培养采用暗培养和光培养两个阶段进行。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述暗培养为在16-22℃下避光培养4-6天。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述光培养为在光照强度为50-300勒克司下，温度为16-25℃培养35-45天。

7.根据权利要求1-6任意一项所述的方法，其特征在于，所述静止液体培养基的制备过程为：由黄豆2-5％、葡萄糖1-2％、奶粉2-8％、磷酸二氢钾0.01-0.02％、硫酸镁0.01-0.015％、维生素B₁0.001-0.002％配成营养液，调整pH在5.6-7.2，然后培养液与大米按照1-3∶1的重量比混合，浸泡20-30min后打浆，再按照1∶5-10比例加水稀释，灭菌。