[发明专利]欧缬草的组织培养繁殖方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养繁殖技术领域，具体地，涉及败酱科缬草属药用植物欧缬草(Valeriana officinalis L.)组织培养繁殖方法。

背景技术

欧缬草(Valeriana officinalis Linn.)为败酱科缬草属多年生草本植物，原产欧洲，国内并无野生分布。欧缬草作为国际上认定的药用缬草在欧美使用历史悠久并广泛应用，其根入药主要具有镇静、促进睡眠、抗抑郁和焦虑等功效，且无宿醉作用，用作镇静安眠(镇静剂)，治疗轻、中度失眠与精神紧张等，先后被英、美、法、德、俄、意等22国国家标准以及欧洲植物药治疗科学合作协会(ESCOP)植物药专册目录收载。欧缬草及其制剂目前在欧美市场上十分畅销，年销售额(达到上亿美元)一直列畅销植物药前10名。

缬草属全世界约250余种，我国约有28种1变种(包括栽培1种)，其中一些种虽有药用记载，如缬草(V.pseudofficinalis C.Y.Cheng et H.B.Chen)、宽叶缬草(V.fauriei)、黑水缬草(V.amurensis)、毛节缬草(V.alternifolia)、蜘蛛香(V.jatamansi)等，但非欧缬草(V.officinalis Linn.)。本发明所用资源为欧缬草，其学名经缬草属专家陈虎彪教授鉴定。国内缬草资源中缬草烯酸(2000年美国药典USP24规定欧缬草原料中缬草烯酸不低于0.1％)含量远未达到欧缬草欧美药典的标准，从而无法进入欧美市场。

随着社会压力和生活节奏的加快，我国有20％至30％的国民患有不同程度的失眠，老年群体失眠率更是高达40％。目前治疗失眠主要以合成药物为主，常具有一定的副作用，如头晕目眩、乏力等，因而寻找能促进睡眠的天然植物药非常必要。而解决这些天然植物药的繁殖技术及应用迫在眉睫。

迄今，现在技术中未有欧缬草(Valeriana officinalis Linn.)的组织培养繁殖方法的报道。

发明内容：

本发明旨在提供一种欧缬草(Valeriana officinalis Linn.)的组织培养繁殖方法，用欧缬草幼嫩的腋芽或顶芽作外植体，经无菌处理后，利用培养基进行外植体诱导、丛芽增殖及生根培养，经过试管苗炼苗移栽，达到组织快繁和规模化生产的目的。本发明人工繁殖的欧缬草可用于制备改善睡眠保健食品和药物。

为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：

欧缬草(Valeriana officinalis L.)组织培养繁殖方法，包括用欧缬草幼嫩的腋芽和顶芽作外植体，经无菌处理后，在培养基中进行外植体诱导、丛芽增殖、生根培养、炼苗移栽。

所述无菌处理和外植体诱导是将幼嫩的顶芽或腋芽经0.1％的肥皂液侵泡8～10min，用自来水冲洗干净，用0.1％氯化汞溶液消毒10～15min后取出，用无菌水冲洗5～8次，接种于启动培养基MS+6-BA1.5+NAA0.2上培养；培养条件：3％蔗糖、0.65％琼脂，PH5.，培养温度为(25±1)℃，光照时间12h·d^-1，光照10001ux。

所述增殖培养是将启动培养基培养获得的丛生芽在无菌条件下去掉生长过长的叶片，切成1cm左右的单个小芽，接种在增殖培养基①MS+6-BA1.5+NAA0.2或②MS+6-BA1.0+NAA0.2或③MS+6-BA0.5+NAA0.2上进行增殖培养，培养条件：3％蔗糖、0.65％琼脂，PH5.，培养温度为(25±1)℃，光照时间12h·d^-1，光照10001ux。

所述生根培养是将增殖培养产生的不定芽，分成单株，转至生根培养基①MS+IAA0.2+IBA0.2或②MS+IAA0.5+IBA0.5或③MS+IAA1.0+IBA1.0上诱导生根。

所述炼苗移栽是当不定根生长至0.5～1cm时，移至大棚中，不打开瓶盖，在自然光照条件下炼苗5～7d，取出小苗，小心洗去根部的培养基，用1∶1000的多菌灵溶液浸泡5min后，栽于温室中，加盖塑料薄膜保湿，一周内保持遮光60％和适当湿度，一周后揭去薄膜。

本发明还提供了一种改善睡眠的药物，以上述欧缬草组织培养得到的欧缬草的提取物为原料，加入可接受的药用载体制备而得。

所述的药物是以欧缬草组织培养得到的欧缬草为原料，用95％乙醇提取获得欧缬草提取物，再加入可接受的药用载体。

改善睡眠的保健品，以本发明上述欧缬草组织培养得到的欧缬草的提取物为原料，加入可接受的药用载体制备而得。