[发明专利]一种饲用β-甘露聚糖酶及其制备方法有效
申请号: | 200910095505.X | 申请日: | 2009-01-19 |
公开(公告)号: | CN101481674A | 公开(公告)日: | 2009-07-15 |
发明(设计)人: | 许尧兴;王有良;李艳丽;许少春;柳永 | 申请(专利权)人: | 浙江省农业科学院;浙江湖州笑果生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N9/42;A23K1/165;C12R1/685 |
代理公司: | 杭州丰禾专利事务所有限公司 | 代理人: | 沈伾伾 |
地址: | 310021*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 甘露 聚糖 及其 制备 方法 | ||
1.一种高产β-甘露聚糖酶的黑曲霉(Aspergillus niger)菌株MA-56,其菌种保藏号为CGMCC No.2722。
2.一种饲用β-甘露聚糖酶,其特征在于:该饲用β-甘露聚糖酶以黑曲霉(Aspergillus niger)菌株MA-56 CGMCC No.2722为生产菌种,接种于由麸皮、豆粕和魔芋粉按重量份60~90∶10~40∶1~6比例配制成的固体培养基中,经发酵、培养、烘干、检测后获得。
3.一种制备权利要求2所述饲用β-甘露聚糖酶的方法,其特征在于按以下步骤进行:
(1)黑曲霉(Aspergillus niger)菌株MA-56 CGMCC No.2722各级培养基的配制:包括,
①斜面种子培养基:去皮马铃薯200g/l,蔗糖20g/l,琼脂20g/l,自然pH,经0.1Mpa灭菌20min;
②固体种子培养基:300ml三角瓶中装入由麸皮、豆粕和魔芋粉按重量份80∶19∶1比例配制而成的培养基10g,按与固形物重量1∶1比例加入自来水,搅拌均匀,经0.1Mpa灭菌30min;
③固体生产培养基:先将麸皮、豆粕和魔芋粉按重量份60~90∶10~40∶1~6比例配制成固体培养基;再将该固体培养基与水按重量1∶0.9~1.3的比例加水并搅拌均匀,装入布袋中,经0.1Mpa灭菌30min,冷却后均匀置于曲盘中,发酵物料厚度为2~3cm;
(2)斜面种子制备:将黑曲霉菌株MA-56划线接种在步骤(1)①斜面种子培养基上,于28℃下恒温培养5d后,放置4℃冰箱内保存,备用;
(3)固体种子制备:将步骤(2)斜面种子用无菌蒸馏水制备成浓度为1×107~108个/ml的孢子悬浮液后,吸取2ml接入步骤(1)②固体种子培养基中,于28℃下恒温培养3d,再与无菌蒸馏水按重量1∶100比例搅拌混合后,用双层纱布在无菌条件下过滤,得到浓度为1×107~108个/ml固体种子孢子悬浮液,备用;
(4)发酵生产:将步骤(3)固体种子孢子悬浮液与步骤(1)③固体生产培养基按重量份15~30∶100比例混合均匀后,置28℃曲房中发酵培养56h得饲用β-甘露聚糖酶酶曲;
(5)酶曲的后处理、质量检测及包装:将步骤(4)酶曲置40℃鼓风条件下烘干10h、粉碎、过80目筛,得酶干曲;将经饲用β-甘露聚糖酶活力检测达到1×105~1.3×105U/g的酶干曲包装、封口即成产品。
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