[发明专利]从羽芒菊中分离纯化的新黄酮类化合物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于黄酮类化合物及其制备方法技术领域，具体为从羽芒菊中分离纯化的黄酮类化合物及其制备方法。。 

背景技术

黄酮类化合物是一类广泛存在于植物界的重要生物活性物质，具有抗氧化、抗衰老、抗病毒、抗肿瘤、抗菌等作用。生物的抗氧化能力与其抗病性、抗逆性及延缓衰老密切相关，因而从天然植物中寻找有效的抗氧化剂应用于医药、食品、保健品、化妆品等中是当前的研究热点之一。 

羽芒菊(Tridaxprocumbens.L)为菊科长柄菊属多年生草本植物，甘微，苦寒，羽芒菊叶和花有抗菌消炎的作用，经常用于割伤、擦伤、创伤伤口止血，同时还可以有效阻止脱发。羽芒菊原产于美洲热带地区，后传播于印度、中南半岛及印度尼西亚等国，我国引入广东、台湾及海南等地。关于从羽芒菊中分离纯化的新黄酮类化合物及其制备方法，经文献检索，尚未见研究报道。 

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种从羽芒菊中分离纯化的新黄酮类化合物及其制备方法的技术方案，其制备工艺简单，得率高，制得的单体化合物具有较强的抑菌活性和抗氧化活性。 

所述的从羽芒菊中分离纯化的新黄酮类化合物，化学名称为：8，3′-二羟基-3，7，4′-三甲氧基-6-O-β-D-葡萄糖黄酮苷，具有(I)所示结构式： 

所述的从羽芒菊中分离纯化的新黄酮类化合物，化学名称为：8，3′-二羟基-3，7，4′-三甲氧基-6-O-[α-L-鼠李糖基-(1→2)]-β-D-葡萄糖黄酮苷，具有(II)所示结构式： 

所述的从羽芒菊中分离纯化的新黄酮类化合物，化学名称为：8，3′-二羟基3，7，4′-三甲氧基黄酮，具有(III)所示结构式： 

所述化合物I、II、III的制备方法，其特征在于包括以下步骤： 

1)取干燥的羽芒菊全草粗粉作原料，用70％乙醇渗漉提取，收集渗漉液； 

2)将渗漉液真空薄膜浓缩至无醇味，回收乙醇，得到浸膏； 

3)将浸膏加入适量水进行超声分散，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，将所得各部位萃取液减压浓缩得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位； 

4a)将步骤3)所得的乙酸乙酯部位超声分散于水中，通过Diaion HP-20大孔吸附树脂柱色谱，依次用H₂O、10％MeOH、20％MeOH、40％MeOH、60％MeOH、70％Me₂CO进行洗脱，得到各洗脱部位；Diaion柱的40％MeOH洗脱部位再通过Sephadex LH-20凝胶吸附树脂柱色谱，然后以H₂O、20％MeOH、40％MeOH、60％MeOH、70％Me₂CO进行洗脱； 

将Sephadex柱的40％MeOH洗脱部位通过硅胶柱色谱，以体积比5-7∶1-3∶1的乙酸乙酯-乙醇-水进行洗脱，洗脱液真空浓缩干燥得化合物I的浅黄色粗品，再经甲醇-水混合溶剂重结晶，得化合物I的浅黄色结晶； 

将Sephadex柱的20％MeOH洗脱部位通过硅胶柱色谱，以体积比6-8∶1-3∶1-3的乙酸乙酯-乙醇-水进行洗脱，洗脱液真空浓缩干燥得化合物II的浅黄色无定型粉末； 

4b)将石油醚部位通过硅胶柱色谱，以体积比20∶1-1∶10的石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，TLC检识，相同流份合并后得8个部分，其中以化合物III为主成分的第4部分再通过硅胶柱色谱，然后再以体积比4-6∶1的石油醚-乙酸乙酯进行洗脱，洗脱液真空浓缩干燥得化合物III的浅黄色结晶。 

上述步骤1)中羽芒菊全草粗粉用3倍量的70％乙醇渗漉提取。 

上述步骤4a)中Sephadex柱的40％MeOH洗脱部位通过硅胶柱色谱，以体积比6∶2∶1的乙酸乙酯-乙醇-水进行洗脱； 

Sephadex柱的20％MeOH洗脱部位通过硅胶柱色谱，以体积比7∶2∶2的乙酸乙酯-乙醇-水进行洗脱。 

上述步骤4b)中石油醚-乙酸乙酯的体积比15∶1-1∶5。 

上述从羽芒菊中分离纯化的新黄酮类化合物及其制备方法，以野生的羽芒菊为原料，来源特别丰富，制备工艺较简单，经济、安全，得率高；制得的3个新黄酮化合物均具有较强的抑菌活性、抗氧化活性和抗肿瘤作用，具有很好的开发利用价值，为今后的研究开发奠定了基础。