[发明专利]特异性扩增hBex1基因的引物及其应用无效
申请号: | 200910097542.4 | 申请日: | 2009-04-09 |
公开(公告)号: | CN101532059A | 公开(公告)日: | 2009-09-16 |
发明(设计)人: | 丁克峰;朱永良;肖乾;庞林荣 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 | 代理人: | 黄美娟;冷红梅 |
地址: | 310027浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 特异性 扩增 hbex1 基因 引物 及其 应用 | ||
1.特异性扩增hBex1基因的引物,序列如下:
上游序列:5′-GATCGTCTCGAGCAGGAGTAATGGAGTCCA-3′;
下游序列:5′-TCTGCTGGATCCTCAGGGCATAAGGCAAAACTC-3′。
2.如权利要求1所述的引物在检测生物样品hBex1基因的表达水平中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述的应用为:以检测生物样品RNA反转录获得的cDNA为模板,加入所述特异性扩增hBex1基因的引物、PCR缓冲液、脱氧三磷酸核苷混合物、DNA聚合酶和Mg2+配成PCR反应液,进行PCR扩增反应,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分离,获得DNA片段即为hBex1基因。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述PCR反应液终浓度组成如下:
PCR缓冲液 终浓度为1×
dNTP 各100~400μmol/L
特异性扩增hBex1基因的引物 各50~200μmol/L
模板 10-3~10-1g/L
TaqDNA聚合酶 1~5U/反应
Mg2+: 0.5~5mmol/L
溶剂为ddH2O。
5.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述PCR扩增反应条件如下:94℃变性2分钟后,进行如下35个循环:94℃变性15S,58℃退火30S,72℃延伸30S。
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