[发明专利]一种两步分离提纯柱及其应用

说明书

技术领域

本发明属于化学技术领域，涉及食品检测方法，尤其是食品安全检测的前处理方法，具体为一种两步分离提纯柱及其在食品安全检测中分离提纯邻苯二甲酸酯类的应用。

背景技术

邻苯二甲酸酯类(phthalic acid esters，PAEs)又称酞酸酯，在塑料工业中常用做增塑剂和软化剂，其含量有时可高达高聚体本身的60％，以增大塑料的可塑性和韧性。邻苯二甲酸二正辛酯(DNOP)和邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)均属于邻苯二甲酸酯类，是目前应用非常广泛的增塑剂，具有生殖毒性、胚胎毒性和遗传毒性，它们在人体和动物体内，发挥着类似雌性激素的作用，干扰内分泌，含量高时，被认为可能损害人体肝脏、肾脏和生殖器官，并有致癌风险。它们与塑料基质不以氢键和范德华力连接，彼此保持独立的化学性质，在包装食品时，会迁移到食品中使食品受到污染。由于食品样品中PAEs含量较低，且基质复杂，准确分析测定有较大的难度，目前分析测定的难点是样品的前处理。

发明内容

本发明的目的是提供一种两步分离提纯柱及其在测定邻苯二甲酸酯类的应用，尤其是在分离提纯邻苯二甲酸二正辛酯和邻苯二甲酸二正丁酯的应用。使用本发明的方法可以使包装食品中的邻苯二甲酸酯类(PAEs)得到富集，便于检测。

本发明的一种两步分离提纯柱由上端的活性炭颗粒填料柱和下端的弗罗里硅土填料柱结合制成。

该两步分离提纯柱应用于分离提纯邻苯二甲酸酯类。

所述邻苯二甲酸酯类为邻苯二甲酸二正辛酯或邻苯二甲酸二正丁酯。

固体分离柱的制备采用活性碳柱与弗罗里硅土柱结合，活性炭柱与弗罗里硅土柱均干法上柱，加压使填料压实。

本发明所说的活性炭颗粒，分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司；本发明所说的弗罗里硅土(层析用，60-100目)，学名为硅镁型吸附剂，英文名flolisil，购自温州市化学用料厂。

以下对本发明分案进一步描述：

一、层析柱填料的选取

分别用等量中性氧化铝、酸性氧化铝、弗罗里硅土、硅藻土、硅胶、活性炭颗粒为填料装柱，对邻苯二甲酸二正辛酯和邻苯二甲酸二正丁酯进行动态吸附试验。结果表明活性炭颗粒和弗罗里硅土有较高的吸附率和解吸率，并且除杂效果显著，因此选用活性炭颗粒和弗罗里硅土分别作为填料，两柱结合纯化富集邻苯二甲酸二正辛酯和邻苯二甲酸二正丁酯。

二、上样液流速对吸附效果的影响

活性炭颗粒柱：分别取1mL DNOP和DBP浓度分别为0.00049mg/mL、0.0005235mg/mL的原料液(甲醇为溶剂)，按0.5、1.0、2.0、3.0mL/min的流速通过装柱量为0.500g的活性碳颗粒柱，收集流出液，N₂吹干后，用甲醇定容至1mL，用HPLC进行检测，计算各吸附率。结果表明上柱流速的增大，吸附率降低，造成样品流失。但是流速过慢，吸附时间增加，检测周期延长。综合考虑，上样液流速选择1mL/min较为理想。

弗罗里硅土柱：分别取1mL DNOP和DBP浓度分别为0.00049mg/mL、0.0005235mg/mL的原料液(二氯甲烷为溶剂)，按0.5、1.0、2.0、3.0mL/min的流速通过装柱量为1.000g的活性碳颗粒柱，收集流出液，N₂吹干后，用甲醇定容至1mL，用HPLC进行检测，计算各吸附率。结果表明上柱流速的增大，吸附率降低，造成样品流失。但是流速过慢，吸附时间增加，检测周期延长。综合考虑，上样液流速选择1mL/min较为理想。

三、洗脱体系的确定

本发明中所说的丙酮，其浓度百分比均为体积比，其溶剂为水。