[发明专利]一种乙酸萘酯酶的净化方法有效

专利信息
申请号: 200910100555.2 申请日: 2009-07-07
公开(公告)号: CN101597599A 公开(公告)日: 2009-12-09
发明(设计)人: 张安平;林春绵;胡晓燕;刘维屏;高伟亮;唐盛 申请(专利权)人: 浙江工业大学
主分类号: C12N9/16 分类号: C12N9/16
代理公司: 杭州天正专利事务所有限公司 代理人: 黄美娟;王 兵
地址: 310014*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 乙酸 萘酯酶 净化 方法
【权利要求书】:

1.一种乙酸萘酯酶的净化方法,以蒸馏水为提取剂提取得到的乙酸萘酯酶粗提液先经过硫酸铵分段盐析,然后透析除盐,所得酶液进行净化,其特征在于所述净化方法如下:以0.15~0.25mol/L NaCl溶液为洗脱液,使所得酶液过Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱,收集含有乙酸萘酯酶的洗脱液,冷冻干燥即得乙酸萘酯酶。

2.如权利要求1所述的乙酸萘酯酶的净化方法,其特征在于所述的净化方法如下:

(1)取酶液,以0.15~0.25mol/L NaCl溶液为洗脱液,使酶液过Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱,按照时间梯度分别收集洗脱液,检测各时段洗脱液的乙酸萘酯酶含量,获得洗脱液中乙酸萘酯酶含量与保留时间的关系图,记录出现分离峰的时间段;

(2)然后将剩余酶液按照步骤(1)所述方法进行洗脱,收集出现分离峰的时间段内的洗脱液,所得洗脱液经冷冻干燥得到乙酸萘酯酶。

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