[发明专利]从非变性聚丙烯酰胺胶中回收和纯化DNA片段的方法

权利要求书

1.一种从非变性聚丙烯酰胺胶中回收和纯化DNA片段的方法，该方法具体 步骤如下：

(1)样品清洗：从染色显带后的非变性PAGE胶中切下目标DNA片段，置于 称量皿中，加入双蒸水洗涤；

(2)样品研磨：将洗涤后的胶条移入无菌离心管，利用组织研磨仪将其充 分打碎；

(3)样品浸泡：加入分散缓冲液，所述分散缓冲液为：0.5M醋酸铵，0.01M 醋酸镁，pH8.0的1mM EDTA，0.1％SDS，混匀，60℃温浴1小时；

(4)凝胶去除：加入与上述分散缓冲液等体积的氯仿抽提液，离心，吸取 上清液，移入新的无菌离心管中；

(5)乙醇沉淀：加入上述上清液2倍体积的冰乙醇，混匀，静置10分钟， 离心，弃上清液，经75％乙醇清洗后，倒置干燥；

(6)DNA溶解：加入1×TE缓冲液，溶解，取微量样品检测其质量，其余样品保 存于-20℃待用。