[发明专利]高产聚-β-羟丁酸的巨大芽孢杆菌Bm-10菌株及其筛选方法和应用

权利要求书

1.高产聚-β-羟丁酸的巨大芽孢杆菌Bm-10菌株，其特征在于：高产聚-β-羟丁酸的巨大芽孢杆菌Bm-10菌株的保藏号为：CCTCC NO：M209131。

2.根据权利要求1所述的高产聚-β-羟丁酸的巨大芽孢杆菌Bm-10菌株其特征在于：该菌株菌落乳白色不透明，圆形，较大、直径约3～6mm，表面光滑，边缘整齐，无特殊气味；显微镜观察细胞呈杆状或近椭圆形杆状，粗大，长度约3～5μm，宽度约1.2～1.5μm；趋于扭曲的短链；周生鞭毛，具运动性；革兰氏染色阳性；16S rDNA电泳和测序分析结果表明，其长度为1513bp。

3.根据权利要求1所述的高产聚-β-羟丁酸的巨大芽孢杆菌Bm-10菌株的筛选方法，其特征在于该方法如下：取0.2g土壤，加入5mL蒸馏水，85℃加热15min，进行10^-1～10^-4梯度稀释，选择10^-2浓度100μL涂布牛肉膏蛋白胨培养基平板，30℃培养24h，出现圆形乳白色菌落；挑取单菌落，进一步分离、纯化后，获得菌株。

4.根据权利要求3所述的高产聚-β-羟丁酸的巨大芽孢杆菌Bm-10菌株的筛选方法，其特征在于：牛肉膏蛋白胨培养基的配方包括牛肉膏20g、蛋白胨5g、氯化钠5g、水1L，pH 7.2。

5.根据权利要求1所述的高产聚-β-羟丁酸的巨大芽孢杆菌Bm-10菌株用于聚-β-羟丁酸的制备。

6.根据权利要求1所述的高产聚-β-羟丁酸的巨大芽孢杆菌Bm-10菌株用于聚-β-羟丁酸的制备方法，其特征在于该方法包括以下的步骤：

①挑取适量菌种接入牛肉膏蛋白胨培养液中，30℃活化培养20～30h；装入牛肉膏蛋白胨培养液，取培养的种子培养液，按4～10％的接种量接种后，30℃，200r/min，摇瓶培养80～120h，可得PHB含量占菌体干重的45％～55％的巨大芽孢杆菌菌体；

②将摇瓶所得培养液10000r/min离心5min，收集菌体，无菌水洗涤3次后再用丙酮洗涤一次，之后加氯仿与酒精的混合液提取PHB，然后40℃干燥后可得到白色沉淀即为PHB。