[发明专利]孔雀石绿胶体金检测卡及其生产和使用方法

权利要求书

1.孔雀石绿胶体金检测卡，其特征在于：其包括试纸条和外壳两部分，试纸条置于外壳内。

2.根据权利要求1所述的孔雀石绿抗体胶体金检测卡，其特征在于：所述的试纸条用PVB作为背衬，在PVC衬板的中部叠置硝酸纤维素膜，两端分别叠置吸水垫和样品垫，硝酸纤维素膜和吸水垫、样品垫相搭连，在样品区附置一段含有孔雀石绿单克隆抗体的膜，在硝酸纤维素膜上有一条含孔雀石绿抗原的检测带和一条含羊抗兔IgG的质控带。

3.根据权利要求1所述的孔雀石绿胶体金检测卡，其特征在于：所述的外壳壳体开有加样孔和观察窗。加样孔正对样品垫，观察窗正对硝酸纤维素膜。

4.孔雀石绿胶体金检测卡的生产方法，其特征在于由下列过程与步骤组成：

(1)孔雀石绿半抗原的合成

(2)孔雀石绿免疫抗原的合成；

(3)孔雀石绿单克隆抗体的制备；

(4)胶体金颗粒的制备；

(5)胶体金标记孔雀石绿单克隆抗体；

(6)样品垫的制备，该垫附置一段胶体金标记孔雀石绿单克隆抗体的膜；

(7)孔雀石绿包被抗原的合成；

(8)孔雀石绿固相硝酸纤维素膜的制备，该膜包被一条含孔雀石绿包被抗原的检测带和一条包被羊抗鼠IgG的质控带；

(9)样品垫的处理：选择适当的封闭试剂、表面活性剂和(或)非离子型去污剂单独或以适当比例组合后均匀浸于玻璃纤维素膜，室温干燥备用；

(10)组装孔雀石绿胶体金检测卡，该检测卡用PVB作为背衬，在PVC衬板的中部叠置硝酸纤维素膜，两端分别叠置吸水垫和样品垫，硝酸纤维素膜和吸水垫、样品垫相搭连。

5.根据权利要求4所述的孔雀石绿胶体金检测卡的生产方法，其特征在于所述的半抗原具有式(I)所示结构。

6.根据权利要求4所述的孔雀石绿胶体金检测卡的生产方法，其特征在于所述的免疫抗原具有式(II)所示结构。

7.根据权利要求4所述的孔雀石绿胶体金检测卡的生产方法，其特征在于所述的包被抗原具有式(III)所示结构。

8.孔雀石绿胶体金检测卡的使用方法，其特征在于将30μl待检液加入到微孔中，并充分吹打混匀，将试纸条插入到微孔中，放置5-10分钟内观察结果。

9.根据权利要求8所述的孔雀石绿胶体金检测卡的使用方法，其特征在于所述的待检液是由下列步骤处理得到：

(1)取待检水产品可食部分用绞肉机绞碎后准确称取10.0g于50mL离心管中，加入提取剂，混匀振摇5分钟后取上清液4mL于50mL离心管中，加缓冲液3滴，然后稀释至25mL；

(2)分次把上清液加入层析柱中，用抽提装置从下口加压，加快流速，待完全流干后加4mL蒸馏水洗涤层析柱；

(3)将1mL衍生化试剂加到层析柱中完全流干后，再加入2mL蒸馏水洗涤层析柱，再用1mL洗脱液洗脱收集，加1滴缓冲液后振荡混匀得到待检液。