[发明专利]表面增强拉曼光谱检测动物活性单细胞样品处理方法

权利要求书

1、一种表面增强拉曼光谱检测动物活性单细胞样品处理方法，其特征是：

(1)银溶胶预制备

取9～12mg的固体硝酸银溶于50ml去离子水中，加热至100℃，然后将1ml柠檬酸三钠的水溶液逐滴加入，快速搅拌后继续沸腾2小时～6小时，得到银溶胶的粗制品，离心取下层浓缩的银溶胶备用；

(2)单细胞悬液的制备

将待测的检测样品活性细胞首先用市售的RPMI 1640细胞培养液制成单细胞悬液；

(3)银溶胶-单细胞悬液混合液的制备

取(1)中制备好的银溶胶1～4ml进行第二次离心10分钟，弃上清液后加入50～200μl市售的RPMI 1640细胞培养液制成银溶胶悬浮液，将银溶胶悬浮液与(2)中制备的单细胞悬浮液按1∶4的体积比例混合混匀，制成银溶胶-单细胞悬浮液并在室温下保存；

(4)表面增强拉曼光谱检测样品预处理过程

将混合好的银溶胶-单细胞悬浮液转入电击杯样品池中，进行冰浴，5～10分钟后进行电穿孔，而后立即冲洗出样品池，置冰浴中5～10min后，转移到培养箱中37℃培养10分钟，即可利用共焦拉曼光谱仪检测样品。

2、根据权利要求1所述的表面增强拉曼光谱检测动物活性单细胞样品处理方法，其特征是：所述的柠橄酸三钠的水溶液中含有1％～3％的柠橄酸三钠。

3、根据权利要求1所述的表面增强拉曼光谱检测动物活性单细胞样品处理方法，其特征是：所述的单细胞悬液中细胞密度在10⁵～10⁶个/ml之间。

4、根据权利要求1所述的表面增强拉曼光谱检测动物活性单细胞样品处理方法，其特征是：所述的电击杯电极间隙范围为1、2、3或4mm。

5、根据权利要求1所述的表面增强拉曼光谱检测动物活性单细胞样品处理方法，其特征是：所述的电穿孔电击电压在350V～1000V之间，持续电击时间50ms～100μs。