[发明专利]用于检测人类K-ras基因突变的引物、探针及其使用方法有效
申请号: | 200910111501.6 | 申请日: | 2009-04-13 |
公开(公告)号: | CN101608241A | 公开(公告)日: | 2009-12-23 |
发明(设计)人: | 阮力;何东华;郑立谋 | 申请(专利权)人: | 厦门艾德生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;G01N21/64 |
代理公司: | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 | 代理人: | 张松亭 |
地址: | 361000福建省厦门市海沧区*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 人类 ras 基因突变 引物 探针 及其 使用方法 | ||
1.用于检测人类K-ras基因7个热点突变的引物及探针,包括:
以下序列的引物对:
(1)TGGTAGTTGGAGCTGA(SEQ ID NO:1)
CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:2);
(2)TGGTAGTTGGAGCTGC(SEQ ID NO:3)
CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:4);
(3)TGGTAGTTGGAGCTGT(SEQ ID NO:5)
CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:6);
(4)TGGTAGTTGGAGCTA(SEQ ID NO:7)
CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:8);
(5)TGGTAGTTGGAGCTC(SEQ ID NO:9)
CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:10);
(6)TGGTAGTTGGAGCTT(SEQ ID NO:11)
CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:12)以及
(7)TGGTGGAGCTGGTGA(SEQ ID NO:13)
CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:14)和
以下序列的探针:
FAM-5’CGTGCCTTGACGATACAGCT3’-NH2(SEQ ID NO:15)
5’-GTATCGTCAAGGCACTCTTG-3’-DABCYL(SEQ ID NO:16)
以及内控引物对
5′-GCCTTCCCAACCATT-3′(SEQ ID NO:17)
5′-CATTCCCCAAGAGCTTAC-3′(SEQ ID NO:18)
和内控双链置换探针
HEX-5’TTGACAACGCTATGCTC3’-NH2(SEQ ID NO:19)
5’GAGCATAGCGTTGTCA-3’-Dabcyl(SEQ ID NO:20)。
2.一种检测人类K-ras基因7个热点突变的检测试剂盒,所述的试剂盒至少包括:
以下序列的引物对:
(1)TGGTAGTTGGAGCTGA(SEQ ID NO:1)
CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:2);
(2)TGGTAGTTGGAGCTGC(SEQ ID NO:3)
CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:4);
(3)TGGTAGTTGGAGCTGT(SEQ ID NO:5)
CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:6);
(4)TGGTAGTTGGAGCTA(SEQ ID NO:7)
CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:8);
(5)TGGTAGTTGGAGCTC(SEQ ID NO:9)
CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:10);
(6)TGGTAGTTGGAGCTT(SEQ ID NO:11)
CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:12)以及
(7)TGGTGGAGCTGGTGA(SEQ ID NO:13)
CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:14)和
以下序列的探针:
FAM-5’CGTGCCTTGACGATACAGCT3’-NH2(SEQ ID NO:15)
5’-GTATCGTCAAGGCACTCTTG-3’-DABCYL(SEQ ID NO:16)
还包括,作为内控的引物对:
5′-GCCTTCCCAACCATT-3′(SEQ ID NO:17)
5′-CATTCCCCAAGAGCTTAC-3′(SEQ ID NO:18)
和内控双链置换探针
HEX-5’TTGACAACGCTATGCTC3’-NH2(SEQ ID NO:19)
5’GAGCATAGCGTTGTCA-3’-Dabcyl(SEQ ID NO:20)。
3.如权利要求2所述的一种检测人类K-ras基因7个热点突变的检测试剂盒,进一步包括:分装于PCR反应管中的PCR反应缓冲液及DNA聚合酶。
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