[发明专利]用于检测人类K-ras基因突变的引物、探针及其使用方法有效

专利信息
申请号: 200910111501.6 申请日: 2009-04-13
公开(公告)号: CN101608241A 公开(公告)日: 2009-12-23
发明(设计)人: 阮力;何东华;郑立谋 申请(专利权)人: 厦门艾德生物医药科技有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11;G01N21/64
代理公司: 厦门市首创君合专利事务所有限公司 代理人: 张松亭
地址: 361000福建省厦门市海沧区*** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 用于 检测 人类 ras 基因突变 引物 探针 及其 使用方法
【权利要求书】:

1.用于检测人类K-ras基因7个热点突变的引物及探针,包括:

以下序列的引物对:

(1)TGGTAGTTGGAGCTGA(SEQ ID NO:1)

   CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:2);

(2)TGGTAGTTGGAGCTGC(SEQ ID NO:3)

   CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:4);

(3)TGGTAGTTGGAGCTGT(SEQ ID NO:5)

   CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:6);

(4)TGGTAGTTGGAGCTA(SEQ ID NO:7)

   CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:8);

(5)TGGTAGTTGGAGCTC(SEQ ID NO:9)

   CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:10);

(6)TGGTAGTTGGAGCTT(SEQ ID NO:11)

   CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:12)以及

(7)TGGTGGAGCTGGTGA(SEQ ID NO:13)

   CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:14)和

以下序列的探针:

FAM-5’CGTGCCTTGACGATACAGCT3’-NH2(SEQ ID NO:15)

5’-GTATCGTCAAGGCACTCTTG-3’-DABCYL(SEQ ID NO:16)

以及内控引物对

5′-GCCTTCCCAACCATT-3′(SEQ ID NO:17)

5′-CATTCCCCAAGAGCTTAC-3′(SEQ ID NO:18)

和内控双链置换探针

HEX-5’TTGACAACGCTATGCTC3’-NH2(SEQ ID NO:19)

5’GAGCATAGCGTTGTCA-3’-Dabcyl(SEQ ID NO:20)。

2.一种检测人类K-ras基因7个热点突变的检测试剂盒,所述的试剂盒至少包括:

以下序列的引物对:

(1)TGGTAGTTGGAGCTGA(SEQ ID NO:1)

   CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:2);

(2)TGGTAGTTGGAGCTGC(SEQ ID NO:3)

   CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:4);

(3)TGGTAGTTGGAGCTGT(SEQ ID NO:5)

   CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:6);

(4)TGGTAGTTGGAGCTA(SEQ ID NO:7)

   CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:8);

(5)TGGTAGTTGGAGCTC(SEQ ID NO:9)

   CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:10);

(6)TGGTAGTTGGAGCTT(SEQ ID NO:11)

   CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:12)以及

(7)TGGTGGAGCTGGTGA(SEQ ID NO:13)

   CTGCACCAGTAATATG(SEQ ID NO:14)和

以下序列的探针:

FAM-5’CGTGCCTTGACGATACAGCT3’-NH2(SEQ ID NO:15)

5’-GTATCGTCAAGGCACTCTTG-3’-DABCYL(SEQ ID NO:16)

还包括,作为内控的引物对:

5′-GCCTTCCCAACCATT-3′(SEQ ID NO:17)

5′-CATTCCCCAAGAGCTTAC-3′(SEQ ID NO:18)

和内控双链置换探针

HEX-5’TTGACAACGCTATGCTC3’-NH2(SEQ ID NO:19)

5’GAGCATAGCGTTGTCA-3’-Dabcyl(SEQ ID NO:20)。

3.如权利要求2所述的一种检测人类K-ras基因7个热点突变的检测试剂盒,进一步包括:分装于PCR反应管中的PCR反应缓冲液及DNA聚合酶。

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